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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit
- 库存:
352
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京固定组织RNA提取试剂盒价格在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京固定组织RNA提取试剂盒价格
品牌:百奥莱博
编号:WE0196
英文名:RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit
本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中有效纯化总RNA。适合从小于30 mg的石蜡包埋组织或切片中抽提高纯度的总RNA,本试剂盒无需使用酚/*仿抽提和异丙醇沉淀,一小时内即可完成多个样品的抽提。本品使用专门优化的裂解液和蛋白酶K,释放福尔马林固定或组织切片样本中的RNA,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除由福尔马林交联造成的抑制作用,有效释放组织切片中的RNA,而避免危害RNA的完整性;优化的缓冲系统使裂解液中的RNA可特异结合到硅胶吸附膜上,而其他污染物可流过膜;可通过漂洗步骤有效去除,经过洗脱的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time PCR和印迹分析等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 25ml |
| 蛋白酶K | 12.5mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 过滤柱FM及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RS及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
自备试剂:无水乙醇(新开封或提取RNA专用)、10mM PBS(PH7.4)(固定液中的组织)。
产品特点:
1、安全-无酚*仿等有机物抽提。
2、快速-可在一小时内完成实验。
3、高效-提取RNA得率高、纯度好。
4、可从石蜡包埋或福尔马林固定样品中提取高纯RNA。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入0.625ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
3、获得样品后,要尽快将样品在4%-10%的福尔马林中固定,固定时间以14-24小时为宜,时间过长易导致RNA断裂,影响下游实验。
4、确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制蛋白酶K 的作用。
5、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
6、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、样本处理:
① 石蜡包埋样本:用手术刀将组织块中多余的石蜡修剪掉,露出组织。
② 福尔马林等固定液中的样本:取约20 mg的样本,切成小块,置于离心管中,加入500μl 10mM PBS(PH7.4),涡旋振荡,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,重复3次,可直接进行第7步操作。
2、将组织块切成5-10μM的薄片。
注意:如果样品表面已经暴露在空气中,请将接触空气的2-3片弃掉不用。
3、取约1×1cm2的切片(共约4-5片切片)置于离心管(自备)中,加入1ml二甲*,盖紧管盖,涡旋震荡10秒。
4、12000rpm离心2分钟,小心吸弃上清,注意不要吸弃沉淀。
5、加入1ml无水乙醇,涡旋震荡混匀。12000rpm离心2分钟,弃上清,注意不要吸弃沉淀。
注意:乙醇可以除去样品中残余的二甲*。
6、打开管盖,室温或最高至37℃孵育10分钟,直至无乙醇残留。
7、加入150μl Buffer GTL,重悬沉淀;加入10μl 蛋白酶K ,涡旋震荡混匀。
8、56℃孵育15分钟,直至样品完全溶解。80℃孵育15分钟。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸,孵育的温度过高或时间过长可能造成RNA断裂,产生RNA碎片。
2)56℃孵育后的样品可置于室温,直至水浴锅或干浴锅温度达到80℃后再把样品置于80℃孵育。
9、加入320μl Buffer GL,涡旋震荡彻底混匀。
10、将步骤9中所得到的溶液全部加入到已装入收集管的过滤柱中。12000rpm离心1分钟,收集滤液。
11、在步骤10得到的滤液中,加入720μl无水乙醇,涡旋震荡彻底混匀。
注意:加入无水乙醇后,可能有少量沉淀物析出,但不影响后续操作。
12、将步骤11中所得的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
13、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
14、重复步骤13。
15、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
16、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-50μlRNase-Free Water,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-20℃保存RNA。
注意:
1)RNase-Free Water体积不应小于20μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用20-50μl新的RNase-Free Water重复步骤16。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤16。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京固定组织RNA提取试剂盒价格正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·NC膜(0.22μM)
编号:WE0299
英文名称:Nitrocellulose Membrane(0.22μM)
规格:1 sheet
·AP标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0391
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG, AP Conjugated
规格:100μl
本产品为碱性磷酸酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别兔IgG,对其他种属IgG无明显交叉反应,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot和ELISA检测。AP即碱性磷酸酶,可以催化BCIP/NBT等底物显色或催化适当的化学发光试剂产生化学发光。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M Tris-HCl,0.25M NaCl,50%甘油,pH8.0
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
应用范围:WB(1:2000-10000)、ELISA(1:2000-20000)
·BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)
编号:WE0324
英文名称:BCIP/NBT Kit(40×)
规格:40ml
BCIP是碱性磷酸酶最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
试剂盒组成:
| 组份 | 40ml |
| 40×BCIP | 1ml |
| 40×NBT | 1ml |
| BCIP/NBT Buffer | 40ml |
注意事项:
1、工作液应现配现用,配制好的工作液1小时内有效。
2、工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。
3、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。
4、NBT有毒,使用时请采取必要的防护措施。
5、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、BCIP/NBT显色工作液配制:根据需要量,将40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT Buffer以1:1:38的体积比混匀后,即为BCIP/NBT显色工作液。
2、显色:
1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到BCIP/NBT显色工作液中),室温避光孵育3-10分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。
2)组织切片或细胞爬片显色:滴加适量的BCIP/NBT显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上,室温避光孵育3-10分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
北京固定组织RNA提取试剂盒价格关键词:WE0196,RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit,固定组织RNA提取试剂盒
ARB11561 人流感病毒B(FLU B)定量分析 Human influenza viruses b,flu b ELISA KIT
ARB13231 小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)酶标法分析 Mouse mucin-5 subtype b,muc5b ELISA KIT
王树脂 β-carotene
月桂酸甲酯 4-Nitrobenzaldehyde 111-82-0
ARB10146 人rAs同源物基因家族成员b(RHOB)含量测试 Human ras homolog gene family,memmber b,rhob ELISA KIT
BTN60306 柱式血液DNAOUT Column Blood DNAOUT
50-89-5 Thymidine 胸腺嘧啶核苷
PY02-432 SBG磺胺增菌液 250克
ARB11396 人神经肽B(NKB)elisa检测操作说明书 Human neurokinins b,nkb ELISA KIT
2,2-二羟甲基丁酸 2,6-Dimethylphenol 10097-02-6
ARB11717 人循环免疫复合物(CIC)elisa测定使用说明书 Human circulating immune complex,cic ELISA KIT
ARB13415 鸡B因子(BF)Elisa分析 Chicken factor b,bf ELISA KIT
PP2501 碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT)
BTN130642 核酸内切酶VIII Endonuclease VIII
BL1296 His标签纯化树脂(Ni-NTA Resin)
CV0501 通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒
北京固定组织RNA提取试剂盒价格关键词:WE0196,RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit,固定组织RNA提取试剂盒
·PVDF膜(0.22μM)
编号:WE0300
英文名称:PVDF Membrane(0.22μM)
规格:1 sheet
·Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
编号:WE0232
英文名称:Y Human Male DNA Quantification Kit
规格:1ml|5ml
本产品是一种检测人类男性Y染色体浓度的实时荧光定量PCR试剂盒,包括精心优化的PCR反应液、引物混合物、标准品,尤其适用于珍贵、微量DNA样本的定量检测。试剂盒采用了全新高效、快速的热启动扩增酶Goldstar Taq DNA Polymerase,有效避免常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。本品实现对Y染色体的准确定量,后续可应用于各种领域如遗传制图、物种多态性研究、疾病基因定位、亲子鉴定和法医鉴定等研究分析。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因 此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
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文献和实验,第一:采用直接过柱子方法,彻底抛弃了TRIzol苯酚,氯仿原理方法,使用无毒原料,并且添加了有自主知识产权的去除多糖多酚成分解决了多糖多酚和代谢产物对于RNA的破坏和干扰分离。第二:突破了直接过柱子的方法DNA去除的技术难点,解决了DNA残留过多问题。经过实践过程中,几十种国内外试剂盒包括Qiagen的RNeasy mini kit 提取失败的例子,包括棉花苹果等试剂盒不易提取的样品,使用北京艾德莱生物的EASYspin植物RNA提取试剂盒,20分钟可以轻松提取,不需要液氮,无苯酚氯仿。高质
填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒(包括多糖多酚困难样品)
的EASYspin植物RNA提取试剂盒,20分钟可以轻松提取,不需要液氮,无苯酚氯仿。高质量的RNA可以成功完成下游反应试验。第三:实践过程中我们发现,部分复杂植物或者DNA含量特别丰富的植物样品使用Qiagen的RNeasy plant mini kit 会有明显残留。尝试北京艾德莱的RN09 EASYspin植物RNA快速提取试剂盒也一样有明显残留。对此问题Qiagen并没有提供优秀的解决方案。Qiagen只是建议使用传统的DNA酶消化的方法来解决,但是众所周知DNA酶消化的方法非常繁琐,费时间,消化
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