- ￥288
- 碧云天（beyotime）
- P0037-100ml
- 2025年11月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
100ml
Western及IP细胞完全裂解液(Cell Complete Lysis Buffer for Western and IP)，是一种在Western及IP细胞裂解液(P0013)的基础上添加了除粘增溶剂，在非变性条件下通常能完全裂解细胞或组织样品从而制备出裂解效果更好的蛋白样品的裂解液。本裂解液裂解的细胞或组织样品，可以用于PAGE、Western、免疫沉淀(Immunoprecipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等[1]。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。
本产品的性能和用途与碧云天生产的普通型Western及IP细胞裂解液(P0013)基本相同，但本产品添加了特殊的除粘增溶剂，可以有效消除普通型Western及IP细胞裂解液(P0013)在提取细胞和组织样品时可能出现的絮状或粘稠状物，使裂解后的样品更易于吸取、操作更加精准便利，同时也显著提高了细胞或组织样品的蛋白提取效果。
通常情况下将本产品加入样品后作用约1-2分钟，絮状或粘稠状物就会消失，可以显著改善在提取蛋白时出现的絮状或粘稠状物问题，并且能够提高蛋白的提取率，相同条件下使用本完全裂解液制备样品的蛋白得率比普通型裂解液要高约5-20%。本完全裂解液(P0037) (Complete)和普通型Western及IP细胞裂解液(P0013) (Regular)的蛋白提取效果对比请参考图1。
图1.碧云天Western及IP细胞完全裂解液(P0037)和普通型Western及IP细胞裂解液(P0013)对不同细胞的蛋白提取效果对比图。长满6孔板的等量HCT-116和NRK-52E细胞，分别加入完全型(Complete)和普通型(Regular)裂解液各150微升裂解细胞，提取蛋白样品，使用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (P0010)测定蛋白浓度。普通型裂解液提取的HCT-116和NRK-52E细胞样品蛋白浓度分别为4.21mg/ml和2.19mg/ml，完全型裂解液提取的HCT-116和NRK-52E细胞样品蛋白浓度分别为4.60mg/ml和2.54mg/ml，完全型裂解液提取的HCT-116和NRK-52E细胞样品的蛋白浓度比普通型裂解液分别高9%和16%。实际检测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
本产品含有的除粘增溶剂作用迅速，并且非常稳定。本产品的除粘增溶作用显效非常快，加入样品后仅需作用约1-2分钟絮状或粘稠状物就会消失。本产品冻融10次、在4℃或25℃存放1周其除粘增溶效果基本不受影响；即使在37℃保存1天，加入样品后作用约5分钟絮状或粘稠状物质也会消失。除粘增溶剂含有多种组分，包括不含标签的来自非常见微生物的酶，不会消化样品中的蛋白，通常也不会干扰常规的Western或免疫沉淀实验。
Western及IP细胞完全裂解液的主要成分为20mM Tris (pH 7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，除粘增溶剂，以及sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA，Na3VO4，leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
用Western及IP细胞完全裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| P0037-100ml | Western及IP细胞完全裂解液 | 100ml |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20ºC保存，一年有效。
注意事项：
为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
通常情况下，本产品加入样品后作用约1-2分钟絮状或粘稠状物就会消失，由于样品种类、裂解液的加入比例等实验条件的差异，本产品加入后絮状或粘稠状物消失的时间可能会有所不同。
需自备PMSF。PMSF (ST506)可以向碧云天订购。也可以选购总体效果更佳的碧云天生产的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 50X) (P1045/P1046)，或者根据具体用途选择蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X) (P1048/P1049)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X) (P1050/P1051)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(植物样品抽提用, 50X) (P1055/P1056)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 50X) (P1060/P1061)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X) (P1065/P1066)。如果无需检测磷酸化蛋白，也可以选不含磷酸酶抑制剂的蛋白酶抑制剂化合物。
裂解样品的所有步骤都需在冰上或4ºC进行。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验或者互作蛋白复合物（红色+黄色）洗脱 Step 5：分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验，先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照：证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白（IP）或者互作蛋白对（co-IP，比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y），即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照：用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了，固然是值得高兴
因子通过该通路促进细胞生长等，而血清中恰好含有这些生长因子，所以怕血清中的这些成分造成干扰，才想到要换成无血清培养液，但不知细胞能不能活。文献中关于这方面的说明也蛮少的，我想如果细胞在无血清的条件下能生长的话，最好还是换成无血清培养液过夜。 seagate 放心用含有血清的完全培养基养。6孔板每个孔加60微升裂解液足矣，用细胞刮子推。 cell100 用碧云天的IP蛋白裂解液可将贴壁细胞裂解，wb杂交也没觉得有问题。 有文献报道
(100μM)15高糖+D药物(100μM)+B药物（1mM） 免疫沉淀过程实验试剂：A抗体（santa cruz，IP浓度 1:100）；B抗体（santa cruz，IP浓度 1:100）；Protein A+G Agarose（上海维景生物）蛋白样品的准备：1).对于10厘米细胞培养皿中的贴壁细胞，吸除细胞培养液，PBS洗涤一次，然后加入500微升至2毫升细胞裂解液裂解细胞。可以使用嘉美生物Western及IP细胞裂解液或各种RIPA裂解液等进行细胞的裂解。 2).对于组织样品参考贴壁细胞使用
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