Bst DNA聚合酶2.0

特别提示：包括Bst DNA聚合酶2.0在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Bst DNA聚合酶2.0
英文名称：Bst DNA Polymerase 2.0
产品货号：MT0028
产品规格：1600U|16000U

本品来源于Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I，通过基因工程手段去除了其5’-3’外切酶活性，而保留了5’-3’聚合酶活性。该酶具有很强的链置换能力，因此是Isothermal amplification（LAMP, RT-LAMP)的绝佳用酶。

产品应用：
1．DNA等温扩增；
2．富含GC结构的快速测序；
3．微量模板DNA的快速测序。

产品组成：

组分	1600U	16000U
Bst DNA Polymerase 2.0	200μl	2ml
10×Bst Buffer	1ml×2	20ml
100 mM MgSO4	500μl	5ml

保存条件：-20℃保存，有效期3年。

LAMP等温扩增原理：


单位定义：一个活力单位即在65℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

反应实例：

应用Bst dna聚合酶（大片段）和6对引物进行LAMP实验，1-4：不加酶，0.1μl酶，0.25μl酶，0.5μl酶。M：DNA Marker2000。

典型LAMP扩增反应体系配制：

加入物	加入量
Bst DNA Polymerase 2.0	0.5~1μl
10×Bst Buffer	2.5μl
100mM MgSO4	1.5μl
dNTP Mixture（10mM each)	?3.5μl
模板DNA	10 ng~1μg
*10×LAMP Primers	2.5μl
ddH2O	Up to 25μl

10×Primers：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM LoopF/B each。

热失活：65℃ 30～60min，85℃ 5分钟。

注意事项
1．MgSO4的使用浓度为6～10mM浓度，可自行调整。
2．有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。
3．使用无模板DNA作为对照检测扩增的特异性。


除了Bst DNA聚合酶2.0,，我公司还供应以下相关产品：



名称：10nt随机引物(0.5μg/uL)
货号：BTN131227
规格：250
本产品为长度为10nt的随机引物，序列为5´-(NNNNNNNNNN)-3´，主要用于cDNA的合成和DNA探针标计。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

疑难解答：
Q: 随机引物的长度对cDNA合成有何影响？
A: 文献报道，长度为10个nt的随机引物合成cDNA的效果好于6nt长的随机引物。

名称：结核分枝杆菌基因分型试剂盒(VNTR-9)
货号：WE0118
规格：50次
  本试剂盒是以分子流行病学最新研究进展为基础，经工艺优化后形成的人型结核分枝杆菌基因分型产品。本产品利用结核分枝杆菌基因组中可变数目串联重复序列(variable-number tandem repeats, VNTR)多态性进行基因型分型区分临床菌株，是研究结核分枝杆菌分子流行病学和监测结核病传播状况的有力工具。与现有其它基于VNTR原理的结核分枝杆菌VNTR分型系统相比，这一分型系统对中国流行的菌株具有更强的分辨能力，因此特别适合于中国用户的需求。

  通过对各PCR反应引物序列和预混反应液成份进行精心优化，使得本产品具有很强的抗干扰力。与用户自配试剂相比，本产品显著提升了特异条带信号强度，降低了使用粗制模板(煮沸菌液)时非特异条带的出现率，使实验操作更加简便、快捷的同时，提高了检测成功率。本产品的预混反应液化学稳定性良好，能有效抵抗反复冻融(10次)和较长时间(一周)的室温环境，更好地适应了用户检测工作中的灵活性需求。

  本产品将人型结核分枝杆菌(MTBC)鉴定、非结核分枝杆菌(MOTT)及模板质量鉴定、结核分枝杆菌北京家族菌株鉴定，和后续的9位点VNTR分型鉴定整合在一个试剂盒中，使用户仅需一个试剂盒、12个PCR反应即可获得待测菌株基因型鉴定所需的完整信息。检测的分辨力指数(Hunter-Gaston index，HGI)可达0.989 。并且，基因型鉴定结果可数字化记录，使得不同样本批次，不同地区，不同时间，不同研究者之间的实验数据可以很方便地进行比对和汇集分析，极大地提高了数据的使用效率。

  对鉴定为VNTR-9基因型成簇(所有9个位点具有相同重复数)的样本，若要判定菌株间是否存在近期传播关系，需使用配套产品TB基因分型试剂盒HV-3(货号WE0119)，做进一步的分型鉴定。VNTR-9与HV-3两个产品的结合使用可将检测的HGI提升至0.993 。关于TB基因分型试剂盒HV-3(货号WE0119)产品的更多信息请见其产品说明书。

名称：长片段Taq PCR MasterMix
货号：ALH253
规格：0.5ml|5ml
本品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。可用于长片段DNA扩增和GC含量高，二级结构丰富的片段扩增。

本品使用方便快捷，能避免 PCR 操作过程中的污染，使用时只需取适量MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。

产品组分：
Long Taq DNA Polymerase—————————0.05units/μl
MgCl2——————————————————4mM
dNTPs(dATP, dCTP, dGTP,dTTP)———————0.4mM

质量控制：
经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主残余DNA ；能有效地扩增人基因中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

储存条件：-20℃。

本制品别名：大片段DNA Taq PCR MasterMix

名称：通用引物 1492R
货号：QN0957
规格：250μl(10uM)|1ml
储存条件：-20℃

名称：两管式RT-PCR试剂盒(AMV-Taq)
货号：BTN130921
规格：50次

名称：HGFS Taq DNA聚合酶
货号：MT0032
规格：250U(200T)|2500U(2000T)
HGFS Taq DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶中的一种，其经过基因工程改造的Taq（R660D/F667Y) DNA聚合酶基因。该DNA聚合酶具有较强的ddNTP的渗入能力，因此其适用于终止法DNA测序或SNP分析。

产品组成：

组分	250U	2500U
Klenow Fragment(exo-)（5 U/μl)	50μl	500μl
*10×Klenow Buffer	1ml	1ml×2

*10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl（pH 8.0 at 25 ℃), 50 mM MgCl2, 10 mM DTT.该酶兼容PCR Buffer和内切酶Buffer。

保存条件：-20℃，有效期3年。

单位定义：一个活力单位即在在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

使用方法：
1．按下表配制反应液：

加入物	加入量
HGFS Taq DNA Polymerase（5 U/μl)	0.25μl
5×Power PCR Buffer	10μl
dNTP Mixture(2.5 mM each)	2μl
*模板DNA	Xμl
引物F(10μM)	2μl
引物R(10μM)	2μl
ddH2O	Up to 50μl

模板DNA用量参数(50μl反应体系)：gDNA 100-1000 ng；Plasmid DNA 5-30 ng；cDNA from RT reaction 1-5μl

2．PCR扩增循环参数：

温度	时间	循环
95℃	2分钟	1st Cycle
95℃	20s	30-40 Cycles
Tm	20s
72℃	1kb/1分钟
72℃	2分钟	Last Cycle