2×BaldStar Taq MasterMix(含染料)优

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括2×BaldStar Taq MasterMix(含染料)优惠价在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：2×BaldStar Taq MasterMix(含染料)优惠价
规格：5ml
产地：国产|进口
编号：WE0112
英文名：2×BaldStar Taq MasterMix(With Dye)
  本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，预混好的PCR混合液使操作更加简单快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效Taq DNA Polymerase，在常温下酶的活性被完全封闭，使得该酶在低温或常温下没有活性，从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的缓冲体系使酶的应用更为广泛，使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板，均能高效扩增，特有的MasterMix配方使整个反应体系稳定性更强。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。用本品进行PCR扩增，PCR产物3"末端含有A，可直接用于T/A克隆。本产品特异性强，PCR扩增后无需胶回收去除杂带，可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的PCR、RT-PCR和多重PCR，特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。

产品组成：

 

组份	5ml
2×BaldStar MasterMix(With Dye)	5×1ml
ddH2O	5×1ml

注意：2×BaldStar MasterMix含有BaldStar DNA Polymerase,3.4 mM MgCl2和 400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检测无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残留DNA；
3、能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；
4、2～8℃存放三个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	30 s	30-40 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30-60 s，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaldStar Taq DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

更多有关2×BaldStar Taq MasterMix(含染料)优惠价的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
BL1383 SABC小鼠IgG-POD kit
吡唑 D-Glutamine 288-13-1
F030233 HRP标记山羊抗人IgG(H+L)抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG
亮*酸*基肽酶 T4 RNA Ligase 9054-63-1
PY06-014  乳酸菌检测计数显色培养基  1000ml，用于乳酸菌快速分离与计数
碳酸银 H acid monosodiu*(代"m") salt 534-16-7
ARB10533 人鸟*酸脱羧酶(ODC)尿液中含量检测 Human ornithine decarboxylase,odc ELISA KIT
BTN100840 嘌呤霉素干粉 Puromycin Powder
ARB12734 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)定量分析 Mouse 8-hydroxy-desoxyguanosine,8-ohdg ELISA KIT
CYB163055 羊抗马IgG-FITC
ARB13157 小鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)elisa检测操作说明书 Mouse chorionic gonadotrophin β,β-cg ELISA KIT
4,5-二*荧光素 Copper pyrophosphate 2320-96-9
普鲁兰糖 1-Thioglycerol 9057-02-7
DL-高*丙*酸 2′-dI 1012-05-1
ARB11596 人晚期糖基化终末产物(AGEs)elisa检测说明书 Human advanced glycation end products,ages ELISA KIT
F030435 胶体金标记山羊抗鸡IgY IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Chicken IgY(IgG)*GOLD
ARB12074 大鼠内皮抑素(ES)血清中含量检测 Rat endostatin,es ELISA KIT
F030504 FITC标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*FITC
Z-甘*酰-L-脯*酰-L-精*酰对硝基*(代"*")胺醋酸盐 2-Hydroxyphenylacetic acid 102679-70-9
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PY02-006  双料乳糖胆盐胨水  250克  
ARB13103 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)检测服务 Mouse bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,bmpr-Ⅱ ELISA KIT
NF-213 羊抗人C5血清
ARB10212 人β甘露糖苷酶(β MAnAse)酶标法分析 Human α mannosidase,α manase ELISA KIT
CYB167046 兔抗鸡IgG
3-吲哚甲醛 FMOC-CI 487-89-8
DL-甘油醛 Indian ink 56-82-6
ARB12965 小鼠血管紧张素原(AGT)代做ELISA实验 Mouse angiotensinogen,agt ELISA KIT
BL1207 芽孢染色液(试剂盒)
ARB10744 人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)酶标法分析 Human plasminogen activator inhibitor,pai ELISA KIT
ARB10006 人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)检测服务 Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-hete ELISA KIT
N-三(羟甲基)甲基-2-*基乙磺酸 PBS(Phosphate buffer saline)  powdered 7365-44-8
D-果糖-1,6-二磷酸三* EGTA 38099-82-0
PL1101 质粒大量提取试剂盒(离心柱型)
对硝基*(代"*")基-β-D-吡喃半乳糖苷 DL-Histidine HCL 3150-24-1
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·BL21(DE3)感受态细胞
编号：WE0253
英文名称：BL21(DE3)Competent Cell
规格：100μl×10支
  本产品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。BL21(DE3)菌株适合表达非毒性蛋白，该菌株是以T7 RNA聚合酶为表达系统的外源基因蛋白高效表达的宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子调控，该区整合在BL21染色体上。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。

产品组成：

组份	0.1ml×10支
BL21(DE3)Competen t Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。

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