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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料)
- 保质期:
3年
- 保存条件:
低温保存
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
大量
- 规格:
1 ml / 5×1 ml
| 规格: | 1 ml | 产品价格: | ¥140.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5×1 ml | 产品价格: | ¥563.0 |
2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料)
产品特点
本产品包含 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 反应增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为 2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度地减少人为误差。 它具有下列特点:
1. 显著提高 PCR 反应的特异性和灵敏度,还能有效扩增GC含量高二级结构等复杂模板。
2. 多次冻融或长期放于 4℃不会影响活性;
3. 应用简便,减少误差,降低了对 PCR 条件的要求;
4. 含染料的 MasterMix 产品在 PCR 结束后可以直接上样电泳。
成分规格
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目录号 |
产品名称 |
规格 |
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JK_C63636 |
2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料) |
1ml/5×1ml |
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JK_C63637 |
2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料) |
1ml/5×1ml |
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-20℃可长期保存12个月 | ||
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本产品仅供科研使用 ,不得用于其它用途 | ||
使用方法
(注 意:以下举例为常规PCR体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化)
1. PCR体系
推荐反应体系(25μl)
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试剂 |
用量 |
|
模板DNA |
<1ug |
|
Primer1(10μM) |
0.5μl |
|
Primer2(10μM) |
0.5μl |
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2×Taq Plus PCR MasterMix |
12.5μl |
|
ddH2O |
Up to 25μl |
(注 意:引物浓度请以终浓度 0.1 - 1.0 uM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,
2. PCR程序
注 意:
A. 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
B. 延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Taq DNA Polymerase的扩增效率为1kb/30 sec。
C. 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数)
3. 结果检测
反应结束后取5μl反应产物,加入适量上样缓冲液(含染料的不用加),然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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文献和实验bp 片段,以 pBS 菌液为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:菌液 OD600=0.8 时 2 μL /50 μL PCR 扩增程序:同上 a 扩增程序同。 结果:Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix 试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物 10 μL 用 1% 琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二、genomic DNA扩增 1.大肠杆菌DNA扩增 模板:大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序: 循环数 Step 温度
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增(左图)与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增(右图)。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液,您只需添加模板和引物,然后,开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤,使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样(注意:确保染料与下游应用兼容)。直接
Fast Taq DNA Polymerase都能做到!产品特点:1. 超快速DNA合成(10-15 s/kb)。2. 大幅度提高保真性,约为Taq 酶的3倍,接近Pyrococcus furiosus DNA聚合酶(Pfu)的水平。3. 高退火温度。在比Tm值高3 °C的条件下,引物仍能有效与模板配对结合,有效打开二级结构,避免引物二聚体的形成,提高扩增特异性和效率。4. 能够从含抑制剂较多的模板直接扩增。5. PCR 产物3’末端有一个“A”碱基,可以直接用于T-载体连接克隆
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