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负20度
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12个月
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100
- 供应商:
柯雷生物
- 规格:
50ug
宿主:E.coli
内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
亚细胞定位n/a
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
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文献和实验实验步骤 1. 制备包涵体 1) 取上述含目的蛋白菌液,4℃,6500 rpm 离心 15 min,弃上清; 2) 将沉淀完全重悬于 0.1 倍菌液体积的 1 × IB 洗涤液,反复混匀; 3) 在细胞裂解的过程中将重悬的溶液置于冰上以防止蛋白受热裂解,可选择超声波裂解或 French Press 法
本世纪60至70年代对大肠杆菌的研究使之成为自然界中最普遍为人们所认识的生物体。 大肠杆菌具有两个显著特征:操作简单和能在廉价的培养基中高密度培养,它的这些特征加上十多年外源基因表达的经验使其在大多数科研应用中成为高效表达异源蛋白最常用的原核表达系统。尽管大肠杆菌有众多的优点,但并非每一种基因都能在其中有效表达。 这归因于每种基因都有其独特的结构、mRNA的稳定性和翻译效率、蛋白质折叠的难易程度、宿主细胞蛋白酶对蛋白质的降解、外源基因和E.coli 在密码子利用上的主要
近年来,重组蛋白的应用有了显著增长,与此同时,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品也得以增长。自从亲和标签融合技术出现以来,多种多样的短肽或蛋白亲和标签极大地方便了外源表达重组蛋白的分离与蛋白质复合体的纯化,已成为蛋白质研究领域不可或缺的工具。多聚组氨酸标签(His-tag)是目前高通量蛋白纯化最普遍使用的亲和标签,His 标签融合蛋白的固定化金属离子亲和层析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作为主要的蛋白纯化方法。从重组蛋白
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