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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 英文名：
Recombinant N-Acetyltransferase 2 (NAT2)
- 库存：
大量
- 供应商：
柯雷生物
Residues: Asp20~Val280
Tags: Two N-terminal Tags, His-tag and GST-tag
Accession: P50298
Host: E. coli
Subcellular Location: Cytoplasm.
Purity: >95%
Endotoxin Level: <1.0EU per 1μg (determined by the LAL method).
Formulation: Supplied as lyophilized form in PBS, pH7.4, containing 5% trehalose, 0.01% sarcosyl.
Predicted isoelectric point: 5.1
Predicted Molecular Mass: 60.3kDa
Applications: SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. (May be suitable for use in other assays to be determined by the end user.)
[ USAGE ]
Reconstitute in sterile PBS, pH7.2-pH7.4.
[ STORAGE AND STABILITY ]
Storage: Avoid repeated freeze/thaw cycles. Store at 2-8oC for one month. Aliquot and store at -80oC for 12 months. Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
[ SEQUENCES ]
The sequence of the target protein is listed below.
D LEELTEILQH QIRAIPFENL NIHCGESMEL NLEVIFDQVV RKKRGGWCLQ VNHLLYWALT KMGFEATMLG GYVFNTPANK YSSGMIHLLV QVTLSGKDYI VDAGFGRSYQ MWEPLELTSG KDQPQVPAIF RLTEENGTWY LDQIRREQYV PNQEFVNSDL LEKNKYRKIY SFTLEPRTIE DFESINTYLQ TSPASLFTSK SFCSLQTLEG VHCLVGSTLT YRRFSYKDNI DLVEFKSLTE EEIEDVLKTI FGVSLERKLV
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文献和实验摘要 基因重组蛋白在大肠杆菌中表达时，由于表达量高，往往形成无生物活性的包涵体。包涵体必须经过变性和复性的过程才能获得有活性的重组蛋白。如何提高基因重组蛋白质的复性率，是生物工程技术的一个研究热点。对近年来的重组蛋白质的复性方法做一评述，为研究蛋白质折叠以及复性技术的进一步应用提供依据。 关键词 重组蛋白 包涵体 复性 二硫键 到目前为止，人们表达的重组蛋白质已有4000多种，其中用E.coli表达的蛋白质要占90%以上，尽管基因重组技术为大规模生产目标蛋白质提供
杆菌的包涵体可采用离心收获。 洗涤 包涵体常用的洗涤试剂为中性去垢剂和还原剂。包涵体中主要由重组蛋白组成，同时也含有一些外膜蛋白（Omp C、Omp F、Omp A）、16S 和 23S、5S的r RNA、质粒 DNA 和其它杂质。去除这些杂质，可采用去垢剂 Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂等对包涵体充分洗涤。包涵体洗涤的洁净程度，对于后续的纯化步骤十分重要，包涵体纯度高，可以大大降低后续的纯化压力。但是，变性剂尿素的使用应该注意的是大肠杆菌外膜蛋白Omp T（37 kD
)位于核糖体结合位点（RBS）上游10-100bp处，由调节基因（R）控制，调节基因可以是载体自身携带，也可以整合到宿主染色体上。E.coli 的启动子由位于转录起始位点上游约35bp的六核苷酸序列（-35区）和一短序列隔开的另一六核苷酸序列（-10区）组成[9,10,11]。 有许多启动子可用于在E.coli中的基因表达，包括来源于革兰氏阳性菌和噬菌体的启动子。理想的启动子具有以下特性：作用强;可以严格调控;容易转导入其他E.coli 以便筛选大量的用于生产蛋白的菌株，而且对其诱导是简便
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