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12个月
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100
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柯雷生物
- 规格:
50ug
宿主:E.coli
内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
亚细胞定位n/a
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
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文献和实验,但AtaGenix拥有的丰富实战经验,如高效的毕赤酵母感受态细胞制备,简便的pcr阳性克隆验证方法,高通量的表达测试,严格的无菌操作规范等则是我们的客户能实实在在感受到的。 最后,提高蛋白在酵母系统中的表达量有很多种方法。DNA-转录-翻译-翻译后加工整个表达环节都能影响外源蛋白的表达。分析外源蛋白性质、构建多拷贝质粒(基因串联表达、重复转化等)、选择不同种类的启动子(pAOX、pGAP 等)、采用不同信号肽(载体信号肽或自身信号肽)、增加产物稳定性(培养基中加PMSF,蛋白水解物等)、优化培养
Nature 子刊:中国团队在扇贝足丝蛋白仿生材料研究领域取得重要研究进展
327 ± 32%(图 1a),超过了绝大多数天然的生物纤维(图 1b)。通过对足丝纤维部 (图 1c) 微观结构进行观察,足丝纤维由折叠的片层组成,并且富含 β-sheet 结构 (图 1d)。基于多组学技术从足丝纤维部筛选出关键蛋白组分 Sbp5-2(图 1e), 该蛋白具有显著的序列特点:含有多个重复模块(TRM)并且富含 Cys(图 1f)。体外重组表达该蛋白的重复模块序列成功制备了仿扇贝足丝的重组蛋白纤维(图 1 g-j)。 图 1. 扇贝足丝机械性能与结构以及重组蛋白纤维制备 体外
,或者可以表达以产生重组蛋白。pET-32α(+)载体系列用于表达与109 aa Trx•Tag™硫氧还蛋白融合的肽序列。它属于一种表达系统,可在其激活后产生所需的蛋白质。插入原核宿主细胞。原核细胞如大肠杆菌因为它们廉价,快速的生物量积累和简单的工艺规模扩大,因此是外源蛋白表达的首选宿主。在本文中,我们将重点总结这种在我们的实验室中使用的有用技术。表达后pET-32α(+)载体的构建,蛋白质表达和蛋白质纯化将在本文中详细描述。获得用于构建载体的外源DNA片段插入载体的DNA通常可以使用聚合酶链式反应(PCR
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