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负20度
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12个月
- 库存:
100
- 供应商:
柯雷生物
- 规格:
50ug
宿主:E.coli
内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
亚细胞定位n/a
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
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文献和实验基因沉默的时效性和遗漏,尤其在多基因家族中的非特异性问题尚未得到解决。 目前RNAi 机制尚未完全阐明,因此需要更加深入的研究。 还有 ZFNs技术和TALEN技术 ZFNs(锌指核糖核酸酶)是由一个DNA识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由3-6个Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成,每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基,形成α-β-β二级结构。其中α螺旋的16氨基酸残基决定锌
蛋白质、多肽在高盐存在下,可以结合疏水凝胶,而在盐浓度降低时又可以解脱的原理实现分离。 d、亲和色谱 利用蛋白质、多肽与某些配基的特异性相互作用而进行分离。例如:酶-底物,酶-抑制剂,糖蛋白-凝集素,抗原-抗体等。近来发展了金属螯合亲和色谱,用于纯化表面含色氨酸、酪氨酸、组氨酸等的蛋白质以及(His)6-tagged重组蛋白。 亲和色谱分为特异性亲和色谱和组别亲和色谱两类。肝素、凝集素、染料、金属螯合亲和色谱均为组别亲和色谱(同一配基可以结合许多种蛋白质)。 e、反相色谱 常用于蛋白质、多肽
亲和的方法把它们和杂蛋白分离。 7. 纯化重组蛋白 重组蛋白构建已经考虑到纯化的问题,大大简化了纯化的步骤,但还是会遇到些实际的问题,所以需要详细阅读使用说明和注意事项。 (一) HIS标签重组蛋白可以很方便用镍琼脂糖凝胶FF分离,色谱填料已经螯合好了镍离子,使用非常方便,吸附载量更高,特异性更强,可以选择多种洗脱方式,是纯化这类融合蛋白的最佳工具。 (二) ST融合蛋白在表达时同时表达了谷胱甘肽s转酶,很方便用GST琼脂糖凝胶FF分离,然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物
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