双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-荧光素647·7

双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-荧光素647·7-AAD）产品及特点
细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。在细胞凋亡过程中，细胞内膜的磷酯酰丝氨酸外翻到细胞外膜，而Annexin V（膜联蛋白V）对其有天然的高亲和能力，故可以用荧光素647标记的Annexin V来检测细胞凋亡，但本方法的缺点是不能区分早期和晚期的凋亡细胞。早期和晚期的凋亡细胞的一个重要区别在于细胞膜的完整性（凋亡早期细胞没有丧失膜的完整性），故可以用7-AAD（7-amino-actinomycin D）来染色加以区分。其原理图如下：

本产品就是整合了上述两种方法的高灵敏的细胞凋亡检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，不需要专门花时间准备各种成分。
2. 整合了Annexin V-荧光素647和7-AAD检测法的优点，提高了凋亡细胞检测的
灵敏度和特异性，本方法是目前最灵敏的细胞凋亡检测方法。
3. 7-AAD具有和PI相似的荧光特性，不能通过正常细胞膜，随着细胞凋亡的发生，质膜对7-AAD的通透性逐渐增加。7-AAD发射波谱较PI窄，对其他检测通道干扰更少。7-AAD红色荧光激发波长546nm，发射波长647nm。
4. Annexin V-荧光素647荧光激发波长650nm，最大发射波长665nm。流式细胞仪检测时，建议采用FL4 通道检测。
5. 本产品和流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测兼容。
6. 本产品适用于培养细胞（悬浮或贴壁），不适用于组织样品。
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-荧光素647·7-AAD）使用及效果
2000rpm离心5分钟，收集悬浮细胞；胰酶消化液（无EDTA）消化收集贴壁细
胞。PBS洗涤细胞，2000rpm离心5分钟，收集1~5×105细胞。取500 μL溶液A悬浮细胞，加入5 μL溶液B，混匀，加入5 μL溶液C，混匀。室温避光反应5-15分钟。一小时内荧光显微镜下观察或流式细胞仪检测。