Hank's液

家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法

酶(collagenase) 200U/ml 0.4%台盼兰、0.25胰蛋白酶Method 1 组织块法1、取材：空气栓塞法处死家兔后，在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM培养基（含双抗）。迅速带回到无菌超净台上。（注意事项：椎间盘位于相邻两个椎体之间，取材过程较为繁琐，要求动作迅速，争取在家兔死后半小时内完成，否则，该组织对缺氧耐受性差导致培养失败）。2、剪切：在超净台上，进一步将周围组织分离，用Hank’s液冲洗数遍，直到冲洗液透明为止。眼科剪刀将组织修剪为1~2cm3大小的小组织块，Hank’s

成纤维细胞的培养和形态

丁香园网友hyong915的观点为：成纤维细胞培养（一） 原代培养1、在手术室无菌条件下，切取新鲜的皮肤，增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织，修除表皮和皮下组织，盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内，Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液，眼科剪反复剪切组织块成0.5－1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上，组织块间留约0.3－0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞，放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸

NK细胞活性测定：同位素法

一、原理将用同位素3H-TdR标记的靶细胞与淋巴细胞共同培养时，靶细胞可被NK细胞杀伤。同位素便从被杀伤的靶细胞中释放出来，其释放的量与NK细胞活性成正比。通过测定靶细胞3H-TdR的释放率即可反应NK细胞的活性。二、仪器和材料液体闪烁仪、多头细胞取集器、二氧化碳培养箱、3H-TdR、RPMI1640 完全培养液、Hank's液（pH7.2～7.4）、YAC-1细胞、Triton X-100三、实验步骤1、靶细胞的标记取传代后24h生长良好的YAC-1细胞（存活率>95％）按1×106/mL