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文献和实验PCR clean up using 3M sodium acetate and chilled absolute ethanol
For each 20 ul of PCR product, prepare the following mixture in 1.5 ml Tube. 2 ul of 3M sodium acetate (NaOAc) pH 4.5 40 ul chilled absolute ethanol. Transfer the PCR product (20ul) into the tube containing
:1)振荡,离心 12,000rpm,10 min; 5. 取上清,重复 4 步骤; 6. 加入 1/10 体积的 3M 醋酸钠和 1.5 倍体积的乙醇(或加入等体积的异丙醇),-20C 沉淀; 11. 离心 12,000rpm,10 min; 12. 弃上清,70% 乙醇洗,也可以再用 100% 乙醇洗,然后溶解于 100 ml 水中。 方法二: 注意:我们常用的方法,但是有时有些细菌特别不好提,就用上面的方法。
fragments prior to internucleosomal fragmentation. J. Biol.Chem. 268, 3037-30392. DNA Ladder 测定方法:收获细胞(1′107)沉淀,细胞裂解液,13000rpm′5min, 收集上清,1%SDS和RnaseA(5mg/ml)56°C,2h,蛋白酶K(2.5mg/ml)37°C,2h,1/10体积3M醋酸钠和2.5倍体积的冷无水乙醇沉淀DNA,4°C过夜,14000rpm′15min,最后将沉淀溶解在TE buffer中
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