- ¥1000
- ATCC
- 美国
- AT1034
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
SMD1168H
- 库存：
20
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
500ul甘油菌
基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 菌株类型: | 毕赤酵母 |
| 培养基: | YPD培养基 |
| 生长条件: | 30 ℃, 有氧 |
| 基因型: | pep4 |
| 表型: | pep4-, Mut+ |
| 抗性: | 氨苄和卡那 |
| 质粒转化条件: | 电转 |
| 应用: | 蛋白表达 |
| 诱导方法: | 甲醇 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| AT1034 | SMD1168H | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
SMD1168H是毕赤酵母菌株，属于真核细胞。一般的针对原核生物的抗生素例如卡那和氨苄对酵母是无效的，因此为了防止大肠杆菌等原核生物对酵母培养菌株污染，往往会在培养基中加入一些氨苄和卡那霉素的抗生素，来抑制细菌菌的污染和生长。
SMD1168H毕赤酵母适宜的生长温度是28-30度，一般使用30度培养，温度超过32度可能导致细胞的死亡。
在制作SMD1168H毕赤酵母甘油菌的时候，请不要使用4天以上的平板挑菌保存，尽量使用新鲜的平板。
SMD1168H被推荐用来表达含有Zeocin抗性的酵母表达载体重组质粒，例如pPICZ A, B, C系列的载体。
SMD1168H基因组中的Pep4基因发生突变，造成蛋白水解酶A活性的丧失，可以保护表达产物免受降解，促进表达量的提高。
1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项：
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
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文献和实验和Pichia 2个种属，共有30余种［8］，其中尤以P.pastoris发展最快，研究最清楚。目前，用于外源基因表达的P.pastoris菌株为Invitrogen公司构建，主要有：Y11430，MG1003，GS115，KM71和SMD1168，其中Y11430为野生型，其余皆为组氨酸突变型，GS115有完整的aox1基因，在甲醇培养基上表型为Mut+，当用重组表达载体转化后，由于表达载体线化所用酶不同，其转化子表型可能是Mut+或Muts，可通过MD和MM培养基进行表型的鉴定；KM71的aox
菌，自1969年开发以来，通过数十年的研究，至今已有多个种属被开发出来，新近发展起来的嗜甲醇酵母包括Candida和Pichia 2个种属，共有30余种［8］，其中尤以P.pastoris发展最快，研究最清楚。目前，用于外源基因表达的P.pastoris菌株为Invitrogen公司构建，主要有：Y11430，MG1003，GS115，KM71和SMD1168，其中Y11430为野生型，其余皆为组氨酸突变型，GS115有完整的aox1基因，在甲醇培养基上表型为Mut+，当用重组
纯的CaCl2 制备的感受态细胞，其转化率与进口的同类型试剂相比要低10-2 左右。同样对于保存细胞添加的抗冻剂甘油也应采用高纯度，在感受态细胞制备过程的所用器皿尽量酸洗后乙醇洗涤，超声后用超纯水淋洗。 2实验步骤 2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 （1）用牙签挑取少许大肠杆菌保藏液稀释划线于LB固体培养基上，37℃培养12～16h。 （2）挑取单菌落接种于30ml LB液体培养基中，37℃下培养12～16h。 （3）按1%的接种量将大肠杆菌菌液接种于50mL LB培养基中
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