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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Plant genomic DNA Extraction Kit
- 库存:
398
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京植物基因组DNA提取试剂盒厂商用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多植物基因组DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:北京植物基因组DNA提取试剂盒厂商
品牌:百奥莱博
规格:50次
产地:国产|进口
英文名:Plant genomic DNA Extraction Kit
编号:RFT038
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,能提取多种植物细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | RFT038(50次) | 贮存方式 |
| 缓冲液AP1 | 25 ml | 室温 |
| 缓冲液AP2 | 10 ml | 室温 |
| 缓冲液AP3(浓缩液) | 15 ml | 室温 |
| 漂洗液PW(浓缩液) | 15 ml | 室温 |
| 洗脱缓冲液EB | 15 ml | 室温 |
| RNase A(10 mg/ml) | 300μl | -20℃ |
| 吸附柱CG(白色) | 50套 | 室温 |
| 过滤柱CF | 50套 | 室温 |
| 说明书 | 1份 |
提取获得效率:
| 材料 | DNA得量(μg/100mg) |
| 大麦 | 8-12 |
| 玉米 | 15-20 |
| 番茄 | 4-6 |
| 油菜 | 2-4 |
| 菠菜 | 5-10 |
| 烟草 | 20-25 |
| 小麦 | 25-30 |
准备工作:
1、准备液氮;65℃水浴;无水乙醇;1.5ml灭菌离心管。
2、按照标签所示在缓冲液AP3和漂洗液PW中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3、每次使用前请检查缓冲液AP1,缓冲液AP2和缓冲液AP3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
操作步骤:
如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、取适量植物新鲜组织500mg-1g加入液氮充分研磨,取约100mg粉末置于1.5ml离心管中,加入400μl 缓冲液AP1和6μl RNaseA (10mg/ml),漩涡震荡1分钟。
2、将离心管放在65℃水浴10分钟,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3、加入130μl 缓冲液AP2,颠倒混匀,冰浴5分钟。
4、12,000rpm离心5分钟。
注:此步骤离心去除去垢剂,蛋白以及多糖等杂质。
5、取上清(通常为400μl)转移到过滤柱CF中,12,000rpm 离心1分钟。
6、将滤出液转移到1.5 ml离心管中,加入1.5倍体积(例如400μl的上清液加600μl缓冲液AP3)缓冲液AP3(使用前请注意是否已经加入无水乙醇),立即颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
7、吸取步骤6中的混合液加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放回收集管中。
注:离心吸附柱的最大容积是700μl,如果一次不能完全上柱,可以分次上柱离心,保证全部溶液全部加到离心柱中。
8、向吸附柱CG中加入500μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
9、重复步骤8。
10、可选步骤:如果离心柱的吸附膜上有颜色,向吸附柱CG中加入500μl无水乙醇,12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
11、将吸附柱CG放回废液收集管中,12,000 rpm离心2分钟。
注:此步骤非常重要,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
12、将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl经65℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,12,000 rpm g离心2分钟。
注意:
a.洗脱缓冲液体积最好不少于50μl,体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13、DNA产物-20℃保存。
DNA浓度及纯度检测:
基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。
储存条件:室温,有效期12个月。
欲了解更多北京植物基因组DNA提取试剂盒厂商的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·Western一抗稀释液
编号:RFT089
英文名称:Primary Antibody Dilution Buffer
规格:100ml
本品可以用于Western时一抗的稀释和配制。使用本Western一抗稀释液稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于六个月,可以反复多次用于Western,节约您宝贵的抗体。按照每个一抗稀释10毫升计算,一个包装的Western一抗稀释液可以稀释10个或10次一抗。
使用方法:
参考所用的一抗的说明,以及样品中目的蛋白的含量,按照适当比例例如1:1000、1:500等比例稀释一抗。一抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的一抗,4℃保存,以用于下次的Western。
注意事项:为了能使抗体可以反复多次使用,建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应,以减缓一抗的衰减速度。
储存条件:4℃,有效期12个月。
北京植物基因组DNA提取试剂盒厂商关键词:植物基因组DNA提取试剂盒,Plant genomic DNA Extraction Kit,RFT038
ARB13179 小鼠透明质酸(HA)含量检测 Mouse hyaluronic acid,ha ELISA KIT
ARB11912 人鞭毛蛋白(flAgellIn)Elisa定量检测 Human flagellin ELISA KIT
BL1280 酚:*仿:异戊醇 125:24:1(PH≥7.8)
4-叔丁基茴香醚 D-(-)Salicin 25013-16-5
ARB13767 鸭免疫球蛋白E(IgE)elisa检测 Duck immunoglobulin e,IgE ELISA KIT
517-28-2 Hematoxylin 苏木色精
ARB13903 猪血管内皮*粘着蛋白复合体(VE-cAd)检测服务 Porcine vascular endothelial-cadherin complex,ve-cad ELISA KIT
氧钒酞菁 Astaxanthin 13930-88-6
BTN100215 PBS缓冲液(10×) PBS Buffer,10×
BTN130694 m7G(5′)ppp(5′)G帽结构类似物 RNA Cap Structure Analogs
BTN100908 一站式长效期SDS-PAGE电泳套装 One-Stop Stable SDS-PAGE Pack
ARB10634 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA检测服务 Human serum amyloid p,sap ELISA KIT
ARB11217 人细胞角蛋白18(CK-18)代做ELISA实验 Human cytokeRatin 18,ck-18 ELISA KIT
ARB13018 小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)免费代测 Mouse ldl-ic ELISA KIT
BTN130598 海肾荧光素酶活性检测试剂盒 Renilla Luciferase Assay Kit
ARB13503 鸡碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)酶免分析 Chicken basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
2-*基吖啶酮 dFdCyd 27918-14-5
ARB10105 人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA检测服务 Human gtpase activating protein,gap ELISA KIT
ARB13979 猪凋亡相关因子(FAS/CD95)Elisa方法检测 Porcine factor-related apoptosis,fas ELISA KIT
北京植物基因组DNA提取试剂盒厂商关键词:植物基因组DNA提取试剂盒,Plant genomic DNA Extraction Kit,RFT038
·T4连接酶
编号:RFT168
英文名称:T4 DNA ligase
规格:100U
本T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化而来的,催化相邻DNA链的5’磷酸基团和3’羟基基团以磷酸二酯键结合反应。该酶可催化平末端或粘性末端DNA之间的连接,还可修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交双链中的单链切口。本品可应用于DNA插入片段和载体DNA的粘性末端和平末端的连接,以及线性DNA的自身环化。
产品组分:
T4 DNA ligase (5U/μl)————————100 U (20μl)
10×T4 DNA Ligation Buffer——————0.2 ml
50%PEG Solution————————————0.15 ml
活性定义:此酶的活力单位为Weiss Unit。1个Weiss Unit相当于约200个粘性末端连接单位(cohesive-end ligation unit, CEU)。1个CEU单位定义为在20μl的连接反应体系中,在16℃30分钟内,能使50%的经HindIII消化的λDNA片段连接所需的酶量。
注意事项:
1、T4 DNA Ligase的最终用量不要超过推荐的用量,否则影响连接效率。
2、PEG可以极大提高平末端的连接效率,我们推荐加入终浓度为5% PEG Solution以提高平末端的连接效率。
3、为了提高转化效率,转化时建议所加入连接产物的量不要超过感受态细胞体积的10%。
4、由于T4 DNA Ligase中含有甘油,比较粘稠容易挂壁,建议使用前短暂离心将液体收集到管底,取样时枪头尽量不要深入液面太深以免粘在枪头上造成损失。
储存条件:-20℃。
北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品,欢迎来电咨询选购北京植物基因组DNA提取试剂盒厂商。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP321 快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 异丙醇,70%乙醇,干净吸水纸5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
、 实验流程 1、 总DNA提取 使用DNA提取试剂盒提取植物基因组DNA,通过紫外分光光度计检测或用标准品跑胶检测。一般来说,100ng的基因组DNA作为反应模板是足够的。 2、 EcoR1酶消化(20ul体系/样品) 3、Mse1酶消化(20ul体系/样品) 5、 预扩增(20ul体系/样品) sample 4ul Primer
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
no.DQ434847)转入烟草(Nicotiana tabacum L.cv.W38),所得T0代植株在16h光照(25℃)/8h黑暗条件下培养。1.2 方法1.2.1 转基因植物的PCR鉴定 随机挑取六株T0代转基因烟草,采用植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根生化科技有限公司)提取基因组DNA模板,另外分别以未转化的野生型烟草基因组DNA以及含有OSsec27p的重组质粒作为阴性和阳性对照模板,使用OSsec27p基因特异性引物进行PCR扩增。 取部分扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,检测
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