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- HZbscience
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- HZ0760
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pEU-E01-MCS
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
pEU-E01-MCS
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0760 | pEU-E01-MCS | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 复制子: | pUC ori |
|---|---|
| 质粒分类: | 无细胞表达质粒 |
| 质粒大小: | 3747bp |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Ampicillin |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 5'测序引物: | Sp6:ATTTAGGTGACACTATAGAA |
质粒图谱
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文献和实验后都只是平端产物。这种平端克隆往往效率低，并且有非特异性背景菌落产生，造成筛选困难。Topo平端克隆主要改良载体设计，把ccdB （Control of cell death）基因并入到mcs中，如果没有DNA片断插入，ccdB基因则会表达，ccdB基因的表达蛋白，会破坏细菌的DNA gyrase，造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断，则ccdB基因表达受到阻碍，所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善，节省筛选的时间。Topo平端克隆与Topo TA方法一样，操作简单快速。Zero
PCR Cloning Kit）（Topo XL PCR Cloning Kit） 因为越来越多高确限度热稳定酶如Pfx、Pfu被用于PCR 扩增，使到PCR 后都只是平端产物。这种平端克隆 往往效率低，并且有非特异性背景菌落产生，造成筛选困难。 Topo平端克隆 主要改良载体设计，把ccdB （Control of cell death）基因并入到mcs中，如果没有DNA片断插入，ccdB基因则会表达
起始位点。 2、抗生素抗性基因 可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ 3、多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 4、P/E 启动子/增强子 5、Terms 终止信号 6、 加 poly（A）信号 可以起到稳定 mRNA 作用 二、如何阅读质粒图谱 第一步：首先看 Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核/穿梭质粒） 第二步：再看筛选标记，如抗性，决定使用什么筛选标记。 （1）Ampr 水解β－内酰胺环，解除
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