| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pBBR1MCS-3, pBBR1MCS3, pBBRMCS3 |
| 质粒类型: | 广宿主蛋白表达或克隆载体质粒,广宿主载体质粒 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 克隆方法: | 限制性内切酶,多克隆位点 |
| 启动子: | -- |
| 载体大小: | 5.2 kb |
| 5' 测序引物及序列: | M13-F: TGTAAAACGACGGCCAGT |
| 3' 测序引物及序列: | M13-R: CAGGAAACAGCTATGAC |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 四环素 |
| 筛选标记: | -- |
| 克隆菌株: | DH5α 等 |
| 宿主细胞(系): | 多种微生物物种,是广宿主质粒。 |
| 备注: | 参考文献: [1] Kovach ME, Phillips RW, Elzer PH, Roop RM, 2nd, Peterson KM. pBBR1MCS: a broad-host-range cloning vector. BioTechniques 1994;16:800-2. [2] Kovach ME, Elzer PH, Hill DS, Robertson GT, Farris MA, Roop RM, 2nd, et al. Four new derivatives of the broad-host-range cloning vector pBBR1MCS, carrying different antibiotic-resistance cassettes. Gene 1995;166:175-6. GenBank sequence:XXU25059 |
| 产品目录号: | -- |
| 稳定性/瞬表达: | 稳表达 |
| 组成型/诱导型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃低温保存
- 保质期:
三年
- 英文名:
pBBR1MCS-3
- 库存:
20
- 供应商:
泽叶生物
pBBRMCS3载体基本信息
pBBRMCS3载体质粒图谱和多克隆位点信息

pBBRMCS3载体简介
pBBRMCS3载体序列
LOCUS pBBR1MCS-3 5228 bp DNA linear SYN 10-JAN-2005
DEFINITION Cloning vector pBBR1MCS-3 REP and LacZ alpha peptide (lacZ alpha)
genes, complete cds; and unknown gene.
ACCESSION U25059
VERSION U25059.1 GI:833817
KEYWORDS .
SOURCE Cloning vector pBBR1MCS-3
ORGANISM Cloning vector pBBR1MCS-3
other sequences; artificial sequences; vectors.
REFERENCE 1 (bases 1 to 5228)
AUTHORS Kovach,M.E., Phillips,R.W., Elzer,P.H., Roop,R.M. II and
Peterson,K.M.
TITLE pBBR1MCS: a broad-host-range cloning vector
JOURNAL BioTechniques 16 (5), 800-802 (1994)
PUBMED 8068328
REFERENCE 2 (bases 1 to 5228)
AUTHORS Kovach,M.E., Elzer,P.H., Hill,D.S., Robertson,G.T., Farris,M.A.,
Roop,R.M. II and Peterson,K.M.
TITLE Four new derivatives of the broad-host-range cloning vector
pBBR1MCS, carrying different antibiotic-resistance cassettes
JOURNAL Gene 166 (1), 175-176 (1995)
PUBMED 8529885
REFERENCE 3 (bases 1 to 5228)
AUTHORS Kovach,M.E.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (13-APR-1995) Michael E. Kovach, Microbiology, Louisiana
State University, 1501 Kings Highway, Shreveport, LA 71130, USA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5228
/organism="Cloning vector pBBR1MCS-3"
/mol_type="genomic DNA"
/db_xref="taxon:51198"
/lab_host="Bordetella bronchiseptica"
CDS 1793..2455
/function="required for plasmid replication"
/codon_start=1
/transl_table=11
/product="REP"
/protein_id="AAB06688.1"
/db_xref="GI:833818"
gene complement(3013..3378)
/gene="lacZ alpha"
CDS complement(3013..3378)
/gene="lacZ alpha"
/codon_start=1
/transl_table=11
/product="LacZ alpha peptide"
/protein_id="AAB06689.1"
/db_xref="GI:833819"
CDS complement(3682..4872)
/function="tetracycline resistance determinant"
/codon_start=1
/transl_table=11
/product="unknown"
/protein_id="AAB06690.1"
/db_xref="GI:833820"
ORIGIN
1 ctcgggccgt ctcttgggct tgatcggcct tcttgcgcat ctcacgcgct cctgcggcgg
61 cctgtagggc aggctcatac ccctgccgaa ccgcttttgt cagccggtcg gccacggctt
121 ccggcgtctc aacgcgcttt gagattccca gcttttcggc caatccctgc ggtgcatagg
181 cgcgtggctc gaccgcttgc gggctgatgg tgacgtggcc cactggtggc cgctccaggg
241 cctcgtagaa cgcctgaatg cgcgtgtgac gtgccttgct gccctcgatg ccccgttgca
301 gccctagatc ggccacagcg gccgcaaacg tggtctggtc gcgggtcatc tgcgctttgt
361 tgccgatgaa ctccttggcc gacagcctgc cgtcctgcgt cagcggcacc acgaacgcgg
421 tcatgtgcgg gctggtttcg tcacggtgga tgctggccgt cacgatgcga tccgccccgt
481 acttgtccgc cagccacttg tgcgccttct cgaagaacgc cgcctgctgt tcttggctgg
541 ccgacttcca ccattccggg ctggccgtca tgacgtactc gaccgccaac acagcgtcct
601 tgcgccgctt ctctggcagc aactcgcgca gtcggcccat cgcttcatcg gtgctgctgg
661 ccgcccagtg ctcgttctct ggcgtcctgc tggcgtcagc gttgggcgtc tcgcgctcgc
721 ggtaggcgtg cttgagactg gccgccacgt tgcccatttt cgccagcttc ttgcatcgca
781 tgatcgcgta tgccgccatg cctgcccctc ccttttggtg tccaaccggc tcgacggggg
841 cagcgcaagg cggtgcctcc ggcgggccac tcaatgcttg agtatactca ctagactttg
901 cttcgcaaag tcgtgaccgc ctacggcggc tgcggcgccc tacgggcttg ctctccgggc
961 ttcgccctgc gcggtcgctg cgctcccttg ccagcccgtg gatatgtgga cgatggccgc
1021 gagcggccac cggctggctc gcttcgctcg gcccgtggac aaccctgctg gacaagctga
1081 tggacaggct gcgcctgccc acgagcttga ccacagggat tgcccaccgg ctacccagcc
1141 ttcgaccaca tacccaccgg ctccaactgc gcggcctgcg gccttgcccc atcaattttt
1201 ttaattttct ctggggaaaa gcctccggcc tgcggcctgc gcgcttcgct tgccggttgg
1261 acaccaagtg gaaggcgggt caaggctcgc gcagcgaccg cgcagcggct tggccttgac
1321 gcgcctggaa cgacccaagc ctatgcgagt gggggcagtc gaaggcgaag cccgcccgcc
1381 tgccccccga gcctcacggc ggcgagtgcg ggggttccaa gggggcagcg ccaccttggg
1441 caaggccgaa ggccgcgcag tcgatcaaca agccccggag gggccacttt ttgccggagg
1501 gggagccgcg ccgaaggcgt gggggaaccc cgcaggggtg cccttctttg ggcaccaaag
1561 aactagatat agggcgaaat gcgaaagact taaaaatcaa caacttaaaa aaggggggta
1621 cgcaacagct cattgcggca ccccccgcaa tagctcattg cgtaggttaa agaaaatctg
1681 taattgactg ccacttttac gcaacgcata attgttgtcg cgctgccgaa aagttgcagc
1741 tgattgcgca tggtgccgca accgtgcggc accctaccgc atggagataa gcatggccac
1801 gcagtccaga gaaatcggca ttcaagccaa gaacaagccc ggtcactggg tgcaaacgga
1861 acgcaaagcg catgaggcgt gggccgggct tattgcgagg aaacccacgg cggcaatgct
1921 gctgcatcac ctcgtggcgc agatgggcca ccagaacgcc gtggtggtca gccagaagac
1981 actttccaag ctcatcggac gttctttgcg gacggtccaa tacgcagtca aggacttggt
2041 ggccgagcgc tggatctccg tcgtgaagct caacggcccc ggcaccgtgt cggcctacgt
2101 ggtcaatgac cgcgtggcgt ggggccagcc ccgcgaccag ttgcgcctgt cggtgttcag
2161 tgccgccgtg gtggttgatc acgacgacca ggacgaatcg ctgttggggc atggcgacct
2221 gcgccgcatc ccgaccctgt atccgggcga gcagcaacta ccgaccggcc ccggcgagga
2281 gccgcccagc cagcccggca ttccgggcat ggaaccagac ctgccagcct tgaccgaaac
2341 ggaggaatgg gaacggcgcg ggcagcagcg cctgccgatg cccgatgagc cgtgttttct
2401 ggacgatggc gagccgttgg agccgccgac acgggtcacg ctgccgcgcc ggtagcactt
2461 gggttgcgca gcaacccgta agtgcgctgt tccagactat cggctgtagc cgcctcgccg
2521 ccctatacct tgtctgcctc cccgcgttgc gtcgcggtgc atggagccgg gccacctcga
2581 cctgaatgga agccggcggc acctcgctaa cggattcacc gtttttatca ggctctggga
2641 ggcagaataa atgatcatat cgtcaattat tacctccacg gggagagcct gagcaaactg
2701 gcctcaggca tttgagaagc acacggtcac actgcttccg gtagtcaata aaccggtaaa
2761 ccagcaatag acataagcgg ctatttaacg accctgccct gaaccgacga ccgggtcgaa
2821 tttgctttcg aatttctgcc attcatccgc ttattatcac ttattcaggc gtagcaccag
2881 gcgtttaagg gcaccaataa ctgccttaaa aaaattacgc cccgccctgc cactcatcgc
2941 agtcggccta ttggttaaaa aatgagctga tttaacaaaa atttaacgcg aattttaaca
3001 aaatattaac gcttacaatt tccattcgcc attcaggctg cgcaactgtt gggaagggcg
3061 atcggtgcgg gcctcttcgc tattacgcca gctggcgaaa gggggatgtg ctgcaaggcg
3121 attaagttgg gtaacgccag ggttttccca gtcacgacgt tgtaaaacga cggccagtga
3181 gcgcgcgtaa tacgactcac tatagggcga attggagctc caccgcggtg gcggccgctc
3241 tagaactagt ggatcccccg ggctgcagga attcgatatc aagcttatcg ataccgtcga
3301 cctcgagggg gggcccggta cccagctttt gttcccttta gtgagggtta attgcgcgct
3361 tggcgtaatc atggtcatag ctgtttcctg tgtgaaattg ttatccgctc acaattccac
3421 acaacatacg agccggaagc ataaagtgta aagcctgggg tgcctaatga gtgagctaac
3481 tcacattaat tgcgttgcgc tcactgcccg ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc
3541 tgcattaatg aatcggccaa cgcgcgggga gaggcggttt gcgtattggg cgcatttgcg
3601 cattcacagt tctccgcaag aattgattgg ctccaattct tggagtggtg aatccgttag
3661 cgaggtgccg ccggcttcca ttcaggtcga ggtggcccgg ctccatgcac cgcgacgcaa
3721 cgcggggagg cagacaaggt atagggcggc gcctacaatc catgccaacc cgttccatgt
3781 gctcgccgag gcggcataaa tcgccgtgac gatcagcggt ccagtgatcg aagttaggct
3841 ggtaagagcc gcgagcgatc cttgaagctg tccctgatgg tcgtcatcta cctgcctgga
3901 cagcatggcc tgcaacgcgg gcatcccgat gccgccggaa gcgagaagaa tcataatggg
3961 gaaggccatc cagcctcgcg tcgcgaacgc cagcaagacg tagcccagcg cgtcggccgc
4021 catgccggcg ataatggcct gcttctcgcc gaaacgtttg gtggcgggac cagtgacgaa
4081 ggcttgagcg agggcgtgca agattccgaa taccgcaagc gacaggccga tcatcgtcgc
4141 gctccagcga aagcggtcct cgccgaaaat gacccagagc gctgccggca cctgtcctac
4201 gagttgcatg ataaagaaga cagtcataag tgcggcgacg atagtcatgc cccgcgccca
4261 ccggaaggag ctgactgggt tgaaggctct caagggcatc ggtcgacgct ctcccttatg
4321 cgactcctgc attaggaagc agcccagtag taggttgagg ccgttgagca ccgccgccgc
4381 aaggaatggt gcatgcaagg agatggcgcc caacagtccc ccggccacgg ggcctgccac
4441 catacccacg ccgaaacaag cgctcatgag cccgaagtgg cgagcccgat cttccccatc
4501 ggtgatgtcg gcgatatagg cgccagcaac cgcacctgtg gcgccggtga tgccggccac
4561 gatgcgtccg gcgtagagga tccacaggac gggtgtggtc gccatgatcg cgtagtcgat
4621 agtggctcca agtagcgaag cgagcaggac tgggcggcgg ccaaagcggt cggacagtgc
4681 tccgagaacg ggtgcgcata gaaattgcat caacgcatat agcgctagca gcacgccata
4741 gtgactggcg atgctgtcgg aatggacgat atcccgcaag aggcccggca gtaccggcat
4801 aaccaagcct atgcctacag catccagggt gacggtgccg aggatgacga tgagcgcatt
4861 gttagatttc atacacggtg cctgactgcg ttagcaattt aactgtgata aactaccgca
4921 ttaaagctta tcgatgataa gctgtcaaac atgagaattc ttgaagacga aagggcctcg
4981 tgatacgcct atttttatag gttaatgtca tgataataat ggtttcttag acgtcaggtg
5041 gcacttttcg gggaaatgtg cgcgcccgcg ttcctgctgg cgctgggcct gtttctggcg
5101 ctggacttcc cgctgttccg tcagcagctt ttcgcccacg gccttgatga tcgcggcggc
5161 cttggcctgc atatcccgat tcaacggccc cagggcgtcc agaacgggct tcaggcgctc
5221 ccgaaggt
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文献和实验加、减、换一个载体 的MCS的位点 (给一个表达 载体加、减、换小表达标签,如His6, His10,strep II等,和MCS改造是一样的),其实技术 不是问题,问题在于位点的选择 ,因为载体设计 时应该设计者也考虑过mcs的问题,应该给使用者越多的选择越好,但为什么有的载体只给有限的几个位点呢,一可能是这个载体其他部位本身含有的限制性切点比较多,因而MCS位置的选择比较少,二就是设计者是自用的载体,没有考虑到我们的感受 。 因此如果你要加、减、换MCS,可以按一下几个步骤进行
―――按功能分成:(1)克隆载体 都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增 DNA 片段(基因)的载体。(所以有时实验时扩增效率低下,要注意是不是使用的严谨行载体) (2)表达载体 具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs 等)还具有转录/翻译所必需的 DNA 顺序的载体。 ―――按进入受体细胞类型分:(1)原核载体(2)真核载体(3)穿梭载体(sbuttle vector)指在两种宿主生物体内复制的载体分子,因而可以运载目的基因(穿梭往返两种
载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一、一个合格质粒的组成要素 复制起始位点Ori,即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 抗生素抗性基因:可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 多l克隆位点:MCS克隆携带外源基因片段 P/E:启动子/增强子
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