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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pAAV-MCS
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 腺相关病毒系统 |
|---|---|
| 表达水平: | 高 |
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4650 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | CMV-F: 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3' |
| 3' 测序引物及序列: | hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1520 | pAAV-MCS | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
The pAAV-MCS vector contains the CMV promoter and other elements for high-level gene expression in mammalian cells when a gene of interest is cloned into the multiple cloning site (MCS). This vector contains AAV-2 inverted terminal repeats (ITRs), which direct viral replication and packaging.
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文献和实验加、减、换一个载体 的MCS的位点 (给一个表达 载体加、减、换小表达标签,如His6, His10,strep II等,和MCS改造是一样的),其实技术 不是问题,问题在于位点的选择 ,因为载体设计 时应该设计者也考虑过mcs的问题,应该给使用者越多的选择越好,但为什么有的载体只给有限的几个位点呢,一可能是这个载体其他部位本身含有的限制性切点比较多,因而MCS位置的选择比较少,二就是设计者是自用的载体,没有考虑到我们的感受 。 因此如果你要加、减、换MCS,可以按一下几个步骤进行
―――按功能分成:(1)克隆载体 都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增 DNA 片段(基因)的载体。(所以有时实验时扩增效率低下,要注意是不是使用的严谨行载体) (2)表达载体 具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs 等)还具有转录/翻译所必需的 DNA 顺序的载体。 ―――按进入受体细胞类型分:(1)原核载体(2)真核载体(3)穿梭载体(sbuttle vector)指在两种宿主生物体内复制的载体分子,因而可以运载目的基因(穿梭往返两种
除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AAV的rep和cap基因和Ad E2A、VAI和E4基因。当辅助质粒在没有Ad感染的情况下共转染到人293细胞中,rAAV载体产量超过了pAAV/Ad包装质粒的80倍。另外,有复制能力的AAV在rAAV制备过程中少于0.00125%。此系统的主要优点是(1)无需感染性的腺病毒(2)只使用两个质粒就提高了转染效率和载体的产出。我们相信该双质粒转染系统因其简便性和高产出而使AAV载体系统能被更广泛地使用。该系统尤其将对多rAAV载体的临床前分析有用 1.简介 腺相关
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