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- HZ0296
- 2025年07月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pAC5.1b-EGFP
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
pAC5.1b-EGFP
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0296 | pAC5.1b-EGFP | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | Ac5 |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 昆虫细胞组成性表达质粒 |
| 质粒大小: | 6072bp |
| 质粒标签: | N-EGFP，C-V5，C-6×His |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Ampicillin |
| 筛选标记: | 灭瘟素Blasticidin/潮霉素Hygromycin |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | 昆虫细胞 |
| 诱导方式: | 组成性表达，无需诱导 |
| 5'测序引物: | Ac5-F：ACACAAAGCCGCTCCATCAG |
| 3'测序引物: | BGH-R：TAGAAGGCACAGTCGAGG |
质粒简介
• The Drosophila actin 5C (Ac5) promoter for high-level, constitutive expression of the gene of interest in S2 cells (Chung and Keller, 1990).
• Multiple cloning site to facilitate cloning the gene of interest.
• C-terminal peptide containing the V5 epitope and polyhistidine (6xHis) tag for detection and purification of your protein of interest (if desired).
• Three reading frames to facilitate in-frame cloning with the C-terminal peptide.
• N-terminal EGFP tag for better detection.
• Ampicillin resistance gene for selection of transformants in E. coli.
质粒图谱
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文献和实验-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶；小牛血清；G418；DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter；含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2，获得长4.7 kb的EBVR，包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP，克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
静脉注射，病毒注射总量为 1×10^11 vg/小鼠。Luc 的表达由 cTnT 启动子控制。（DOI: 10.1038/gt.2010.105） 图 4. 五种 AAV 血清型在小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为左心室前壁注射，病毒注射总量为 5×10^10 vg/小鼠，体积为 10μL。Luc 的表达由 cTnT 启 动子控制。（DOI:10.1002/jgm.1576） 图 5. 五种 AAV 血清型以不同剂量注射至小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为颈静脉注射。EGFP
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
，GFP 就拼回来发光，等于肉眼见证蛋白互作。 拆分 GFP 在病毒工具里也实用：比如把 GFP1-10 稳定表达在细胞里，病毒只带一小段 GFP11 融合，能显著减小载体装载负担。相关标准序列可参考 Addgene 的 78590、193867。 怎么选更合理 一句话：看设备、看目的。做共聚焦看蛋白去了哪个细胞器、做活细胞长时间追踪，闭眼选 EGFP/mCherry 这类荧光蛋白，红绿搭配还能多标。做启动子活性比较、做药物筛选看信号涨落、做小鼠体内肿瘤负荷监测，选荧光素酶，灵敏度高、背景干净
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