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- 2025年07月10日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
p3×FLAG-DDX6
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
p3×FLAG-DDX6
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0849 | p3×FLAG-DDX6 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 质粒分类: | 基因文库质粒 |
|---|
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文献和实验的核心。 --- 二、WB 验证的三个技术要点 1. 抗体怎么选 有目的基因特异性抗体 → 直接检测内源+外源总蛋白； 抗体不可得或背景差 → 载体设计时加 Flag/HA/Myc 等融合标签，用抗标签抗体检测； 注意区分：抗标签抗体检测的是"载体表达的蛋白"，基因特异性抗体检测的是"总蛋白（含内源）"，两者含义不同，报告时要写清楚。 2. 条带大小要核对 融合标签会改变蛋白分子量（如 3×Flag 约 +2.5 kDa，GFP 约 +27 kDa）。WB 条带必须与"内源蛋白 + 标签
【求助】克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费？
个和12,000个，其中11,000个克隆的表达已经通过Western Blot的验证。这些克隆以2种形式提供：一种是在表达的蛋白C末端带Myc-DDK(即FLAG)标签，一种是带GFP标签。这些cDNA克隆均构建于pCMV6入门载体上，可方便转换至其他目的载体。 按照其网页上的促销价：900RMB/clone × 100 ＝ 9万RMB， 直接买，不用等时间，就可搞定，批量买估计还可以讲价，关键的是品质有保证。 注：非公司托儿，因前段时间帮朋友筹划项目专门研究
克隆 or 单克隆） --- 一、第一步：载体设计 载体元件由实验目的决定，逐项确认： 元件 选择要点 启动子 普遍高表达选 CMV、EF1α 等；需要模拟内源水平或避免沉默可考虑其他启动子 目的基因 CDS 序列；是否需要做 WB 决定是否加 Flag/HA 等融合标签 荧光标签 是否需要观察感染效率或做活细胞示踪（GFP/mCherry 等） 抗性基因 常用 puromycin（Puro），也可选新霉素（Neomycin）、杀稻瘟菌素（Blasticidin） 其他元件
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