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- HZbscience
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- HZ0269
- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pCMV-VSV-G
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
pCMV-VSV-G
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0269 | pCMV-VSV-G | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | T7，CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,f1 ori |
| 终止子: | β-globin poly(A) |
| 质粒分类: | 病毒系列，慢病毒包装载体 |
| 质粒大小: | 6363bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37℃，有氧 LB |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验birkin 我在尝试转染某种细胞，载体是购买的商业载体（pCMV6)，之前转染HEK293作为预实验，已经用WB证明有效，但是换到现在这种细胞之后就很奇怪，一开始想用短期转，结果WB做不出来，觉得可能是转染率太低，于是又改做稳定转染，用了G418筛选。花了近2个月，细胞稳定下来了，取样做RT-PCR，有相当强的mRNA表达（-RT和对照组转染也做了的，基本没有带，所以不会是污染），谁知做WB还是一点东西都没有……我都快疯了，既然能抗G418，又有大量mRNA
由病毒滴度决定的过程。病毒颗粒首先需要与靶细胞表面相关受体或进入因子发生相互作用，随后完成膜融合并进入细胞。因此，即使使用相同的慢病毒载体，不同包膜也可能表现出明显不同的细胞嗜性和转导效率。 BaEV包膜与细胞表面的ASCT-1和ASCT-2相关，这两种蛋白分别对应氨基酸转运蛋白SLC1A4和SLC1A5。由于与VSV-G的细胞进入机制不同，BaEV慢病毒在部分原代免疫细胞和造血细胞中表现出较好的转导能力。因此，BaEV并不是简单的“VSV-G升级版”，而是针对特定细胞类型提供的另一种包
RNA 运出核、VSV-G 负责包壳，前病毒 RNA 被包装进成熟的病毒颗粒，分泌到培养上清里。吉凯商场也有对应的慢病毒包装试剂盒（含 Lenti-Pro Packaging Mix、阳性对照质粒、Lenti-Pro 转染试剂），方便自己动手。 这里最容易踩的坑 包装前比包装中更重要。 真正决定后面是否顺利的，往往是前端的载体图谱、插入片段长度和质粒质量。等到293T已经转染、上清已经收完才发现表达框过大或构型不合理，返工成本最高。 慢病毒包装流程（用户能看懂的步骤） 下面是一套常规的四质粒 293
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