QuickAntibody-Rabbit8W使用方法(详见使用说明书)
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用生理盐水将抗原稀释到2倍最终浓度(按每针次100μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次20-50μg;(2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次5-10μg。
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充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次100μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
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通过后腿小腿肌肉注射免疫兔子(),每只兔子注射200μl。备注:(1)本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射;(2)也可根据实验习惯选择皮下注射或皮内注射进行免疫。
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第21天和第42天按同样方式分别加强免疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用,注射部位同初次免疫。
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第52-56天采微量血进行ELISA测定,抗体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,即可大量采血。
如何选择QuickAntibody系列免疫佐剂?
QuickAntibody系列免疫佐剂包括以下具有自主知识产权、独特配方的新型免疫佐剂,分别用于制备小鼠单克隆和多克隆抗体(见下表)。
产品名称 |
货号 |
规格 |
免疫周期 |
特点 |
用途 |
预期滴度 |
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KX0210041 |
1ml |
5周 |
标准免疫 |
小鼠单抗 小鼠多抗 |
1:10000- 1:10000000 |
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KX0210042 |
1ml |
3周 |
快速免疫 |
小鼠单抗 小鼠多抗 |
1:10000- 1:100000 |
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KX0210043 |
1ml |
2周 |
快速免疫 |
小鼠多抗 |
1:1000- 1:10000 |
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KX0210045 |
1ml |
8周 |
标准免疫 |
兔多抗 |
1:10000- 1:1000000 |
QuickAntibody系列免疫佐剂有哪些特点?
与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免疫佐剂具有免疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗体滴度高、抗体亲合力高、易获得构象型表位的抗体等多方面优点,详述如下:
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QuickAntibody只需两针免疫,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,与弗氏佐剂相比可减少免疫针次。
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QuickAntibody通过减少免疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为(1)免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,兔子20-50μg);(2)免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
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QuickAntibody抗体产生快,抗体滴度高,抗体亲合力高。以标准免疫程序为例,无论是用于单克隆还是多克隆抗体制备,只需要在三周内进行两针免疫,通常在第五周即可获得ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗体水平。
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QuickAntibody不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克隆抗体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。
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QuickAntibody是一类水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可免疫动物。
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QuickAntibody使用肌肉免疫途径,与常规小鼠单克隆抗体制备中使用足垫免疫或脾内免疫相比,极大方便了使用。
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QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克隆抗体。常规多克隆抗体制备多使用兔子,不但免疫针次多、抗原用量大和抗体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托专门单位制备。使用QuickAntibody免疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克隆抗体,标准免疫程序只需要简单地免疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克隆抗体。(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克隆抗体,1ml高质量的小鼠多克隆抗体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免疫、免疫印迹、流式细胞、免疫组化和免疫沉淀等)。
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QuickAntibody建议常温运输,2~8ºC保存,无菌取用,有效期18个月。
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