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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pCMV6-Entry
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μl
pCMV6-Entry
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0787 | pCMV6-Entry | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 质粒分类: | 哺乳细胞载体;蛋白过表达质粒 |
|---|
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文献和实验之前转染HEK293作为预实验,已经用WB证明有效,你之后的wb有没阳性对照呢或者说用HEK293作为对照呢 birkin chenhaombb wrote: 你用的什么载体啊?稳定转染的?怎么用G418筛选啊,费时费力,直接病毒转 用的pCMV6Entry,已经是慢病毒载体了……就是因为这种细胞转染率太低(据师姐说大概15%)不得已才做稳定转染,想说看看能不能让转染率上来一点
是最容易的方法。扩增你的基因,在其N-末端含有attB1位点,C-末端含有attB2位点。网站上有链接到GATEWAY信息,你通过点击按键即可在你的引物上按顺序加上att位点。你可以利用限制性内切酶和连接酶将你的基因克隆到Entry Vectors中或者购买已包含attB载体的cDNA文库(PCMV.SPORT6或PSPORT-P)。 为什么你们推荐在PCR引物中加上attB位点并且转化PCR产物到一个供体载体中,然后被重组(与attL)进attR位点?为什么PCR
Gateway也可以被视为一种克隆操作平台:把目的基因克隆到入门载体(Entry Vector)后,就不用依赖限制性内切酶,而靠载体上存在的特定重组位点和重组酶,高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体(Destination Vector,目的载体)上。Gateway的原理也是建立在噬菌体DNA定点整合到细菌宿主基因组上。在噬菌体和细菌的整合因子(INF、Int)的作用下,lambda的attP位点和大肠杆菌基因组的attB位点可以发生定点重组,lambda噬菌体DNA整合到大肠杆菌的基因
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