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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0322
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pGEX-HRV3C
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
pGEX-HRV3C
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0322 | pGEX-HRV3C | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | Tac/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori |
| 质粒分类: | 蛋白酶表达质粒 |
| 质粒大小: | 5495bp |
| 质粒标签: | N-GST，N-thromas，3C |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Ampicillin |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | 大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | pGEX5 |
| 3'测序引物: | pGEX3 |
质粒图谱
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文献和实验今天进行了GST融合蛋白的表达，pGEX-4T-1载体,BL21菌。 步骤：摇菌至A600：0.7，然后加IPTG诱导3小时，温度35度（终浓度：0.3mM)，取1ml诱导后菌，离心去培养基，冰冷PBS洗一次，离心，吸净液体，加入1*上样缓冲液50微升和终浓度1mM PMSF，100度煮菌5分钟，离心，取20微升上清跑胶。结果如图。 1.空载体对照有GST的表达 2.所有重组载体同样有GST大小的片断，（箭头 B） 3.箭头A所示的条带在空载体和重组载体处有明显差异。 4.我的目的
！希望大家多讨论一下给我点经验和建议，谢谢大家啦！ kinguangjun 你好！要增加可溶性，可以换成为能增加可溶性表达的载体来试试，例如pGEX-4T-1或pET32a(+)等，如果还是不行，可能只能用真核表达系统啦！ woxingwosu kinguangjun wrote: 你好！要增加可溶性，可以换成为能增加可溶性表达的载体来试试，例如pGEX-4T-1或pET
Protease 是一种由人鼻病毒 14 型的 3C 蛋白酶和 GST 组成的融合蛋白。它可以特异性的将 pGEX-6P 系列等载体表达出的带有酶底物识别氨基酸序列融合蛋白的 GST 标签进行分离。由于其自身带有 GST 标签，Prescission Protease 能在单一步骤实现 GST 标签的柱上酶切和蛋白质纯化。此蛋白酶在低温条件下具有最佳活性，因此低温孵育不仅可以保证 GST 标签的高效去除，也能维持目标蛋白的活性。 Thrombin 和 Factor Xa 常温下具有较高的酶活，当选
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