载体pSilencer-U6-Puro

启动子 怎么选 病毒载体？U6、CMV、CAG、hSyn 一文理清

做病毒载体最容易被忽略、却又最影响结果的一步，就是启动子。一句话结论：启动子决定了"基因在哪些细胞、以多大强度表达"。通用场景用 CMV/CAG 广谱驱动，shRNA 用 U6（Pol III），神经或细胞特异表达就上 hSyn、CaMKIIα、GFAP。 先给一个直接答案 做病毒载体最容易被忽略、却又最影响结果的一步，就是启动子。 启动子到底是什么 启动子是载体上一段控制基因转录的 DNA 序列，相当于"开关 + 音量旋钮"。它结合细胞里的转录机器，决定下游基因要不要转、在哪种细胞里转

siRNA设计指南

U6 vector, nucleotide overhangs to the EcoR I and Apa I restriction sites are added to the 5' and 3' end of the DNA oligonucleotides, respectively (Figure 2). In contrast, for cloning into the pSilencer 2.0-U6, 2.1-U6, 3.0-H1, or 3.1-H1 vectors

siRNA Design Guidelines

a 9-nucleotide spacer (TTCAAGAGA), although other spacers can be designed. 5-6 T's are added to the 3' end of the oligonucleotide. In addition, for cloning into the pSilencer  1.0-U6 vector, nucleotide overhangs to the  Eco R I and  Apa  I restriction sites