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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0362
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pHiL-D2
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
pHiL-D2
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0362 | pHiL-D2 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | AOX1 |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori，FI ori |
| 质粒大小: | 8210bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | HIS4 |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧 LB |
| 表达宿主: | 酵母细胞 |
| 5'测序引物: | AOX5:GACTGGTTCCAATTGACAAGC |
| 3'测序引物: | AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验体质粒，所以一般用整合型载体作为外源基因的表达载体，目前常用的表达载体多是美国Invitrogen公司开发构建的。P.pastoris既有分泌表达型的，又有胞内表达型的。常用的表达载体主要有：pPIC9，pPIC9K，pHILS，pAO815，pHILD2和pPICz等，其中pPIC9，pPIC9K和pHILS为分泌型表达载体，而pAO815，pHILD2和pPICz为胞内型表达载体，不同载体除具有各自特殊的基因组件外，还具有一些共同的序列，如这些载体都包括一个表达盒（cassette）和一
【转帖】教你一种简单、高效的提高重组蛋白质的诱导表达量的方法
。 实验步骤： 1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。 2.引物合成上述简并序列，同时设计合成目的基因反向引物。 3.PCR扩展目的基因，这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列，同时不改变氨基酸序列。 4.双酶切，插入到目标载体。 5.转化。 6.挑选多个克隆（比如100-200个）到1.5ml EP管，直接诱导表达（记得带上为改造克隆菌株的对照）。 7.SDS-PAGE检测。 8.挑选高表达的多个克隆，测序。 怎么样？是不是很简单，不需要做太多的摸索
的酿酒酵母的分泌信号—α交配因子(α-factor)引导序列已经成功地引导了几种外源蛋白的分泌。分泌表达载体主要有：pPIC9，pPIC9K，pHIL-S1，pPICZα A，pYAM75P等。胞内表达载体主要有：pHIL-D2，pA0815，pPIC3K，pPICZ，pHWO10，pGAPZ， pGAPZa(Invitrogen)，pPIC3.5K等。工程菌株Y11430，MG1003，GS115 (AOX1)，KM71，SMD1168。毕赤酵母宿主菌常用的有GS115和KM71两种，都具有
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