YT207型ARE凝胶迁移突变探针(10μM)现货

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北京百奥莱博专业生产销售YT207型ARE凝胶迁移突变探针(10μM)现货，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：YT207型ARE凝胶迁移突变探针(10μM)现货
编号：YT207
规格：30μl
产地：国产|进口
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－ARE的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用 于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

EMSA突变探针－ARE的序列如下：
5"-ACT GAG GGT GAC TCA ATA AAA TC-3"
3"-TGA CTC CCA CTG AGT TAT TTT AG-5"

EMSA突变探针－ARE中ARE的公认的位点发生了突变，从而使相应的转录因子无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常 的标记探针和ARE的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和相应转录因子的结合的条带不会被抑制。参考 下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

除YT207型ARE凝胶迁移突变探针(10μM)现货外，我公司正在打折促销以下产品：
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58-58-2 嘌呤霉素
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·HDAC抑制剂(组蛋白去乙酰化酶抑制剂)(丁酸钠)(Sodium Butyrate)
编号：YT321
英文名称：Histone Deacetylase Inhibitor
规格：1g
本品是一种HDAC(Histone deacetylase，中文名称是组蛋白去乙酰化酶)抑制剂。Sodium Butyrate是一种短链脂肪酸盐，可以不依赖于p53途径诱导结肠癌细胞凋亡，同时可以诱导多种细胞的细胞凋亡；可以抑制c-myc基因的剪接，从而干扰其信号转导途径及钙离子从细胞内钙库的释放。Sodium Butyrate可溶于水。

CAS：156-54-7
分子式：C4H7O2Na
分子量：110.09
纯度：＞99%

储存条件：-20℃，有效期一年。


·BL21甘油菌
编号：YT024
英文名称：E.coli BL 21
规格：200μl
本产品是收集生长在对数期的BL21菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。BL21常用于目的蛋白的原核高表达。

注意事项：
1. 使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。
2. 为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·磷酸酯酶抑制剂(Sodium orthovanadate)(正钒酸钠)
编号：YT350
英文名称：phosphatase Inhibitor
规格：2g
本品是一种常用的磷酸酯酶抑制剂，可以抑制碱性磷酸酯酶、酸性磷酸酯酶、蛋白酪氨酸磷酸酯酶等磷酸酯酶。Sodium orthovanadate也可以抑制Na+/K+ ATPase等ATPase。常用于抑制蛋白去磷酸化或促进蛋白的磷酸化激活，在提取细胞或组织蛋白时常用于保持蛋白的磷酸化状态。

Sodium orthovanadate在酸性条件下，例如pH3.75，可以形成十钒酸盐(Sodium decavanadate)。Sodium decavanadate可以抑制inositol 1,4,5-trisphosphate-(IP3)诱导的钙离子释放，并可以抑制IP3和其受体的结合。在过氧化氢存在时，orthovanadate可以转变成pervanadate(过钒酸盐)。

Sodium orthovanadate可溶于水(100mg/ml)。为确保该为单体形式，可将溶液加热沸腾至半透明，并调节pH至10左右，待冷却后分装于塑料瓶中冷冻保存。如Sodium orthovanadate溶液颜色变橙黄色，为Sodium orthovanadate转化为devanadate，可调节pH至10并加热沸腾，即可重新转变为无色的单体钒酸盐。

CAS：13721-39-6
分子式：Na3VO4
分子量：183.91
纯度：＞99.9%

储存条件：室温。


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·S-ω-氨基酸转氨酶
编号：YT569
英文名称：S-ω-Amino Acid Transaminase (Crude Enzyme)
规格：100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的S-ω-氨基酸转氨酶，并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液，用于催化氨基酸的末端氨基与α-酮酸之间的转氨基作用。

储存条件：-20℃，有效期1个月。

注意事项：
1. 由于本产品需新鲜制备，在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活，所以收到酶液后请根据需要进行分装，并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长，酶活力会有一定程度的下降，收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生，融化后混匀即可，不影响正常使用。

·Bcl-2抑制剂(ABT-199)
编号：YT919
英文名称：Venetoclax
规格：10mM×0.2ml|5mg|25mg
本品是一种Bcl-2选择性抑制剂，无细胞试验中Ki为<0.01nM，比作用于Bcl-xL和Bcl-w选择性高4800倍以上，对Mcl-1没有抑制活性。

CAS：1257044-40-8
分子式：C45H50ClN7O7S
分子量：868.44
纯度：98.5%



储存条件：-20℃，有效期12个月。

·化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒
编号：YT032
英文名称：Chemiluminescent Biotin-labeled Nucleic Acid Detection Kit
规格：1000cm2
本试剂盒是一种通过Streptavidin-HRP及后续的ECL试剂来实现化学发光检测Biotin标记核酸的检测试剂盒。适用于Southern blot、Northern blot、ribonuclease protection assay (RPA)或EMSA等实验中，采用生物素标记的DNA或RNA探针时的检测。本试剂盒不适用于生物素标记蛋白的检测。

本试剂盒采用了高质量的Streptavidin-HRP Conjugate，HRP和Streptavidin共价交联的比例大于3，这样比采用Streptavidin和Biotin-HRP conjugate两种试剂进行检测要更方便，并且灵敏度更高。采用了非特异性结合比avidin更低的strepatavidin，使检测结果背景更低灵敏度更高。

本试剂盒没有提供生物素探针标记相关的试剂，生物素标记的DNA探针或EMSA探针的制备可以相应地使用百奥莱博的生物素标记DNA试剂盒（TdT加尾法）或EMSA探针生物素标记试剂盒(YT189)。本试剂盒可以用于检测至少10块10 x 10cm有生物素标记EMSA探针的膜，即共1000cm2。

试剂盒组份：

ECL A液	55ml
ECL B液	55ml
Streptavidin-HRP Conjugate	100μl
封闭液	380ml
洗涤液(5X)	250ml
检测平衡液	250ml

储存条件：-20℃。

使用说明：
1. 在使用Biotin标记探针的情况下，完成Southern、Northern杂交及后续洗涤后，或RPA的转膜和交联后，或EMSA的转膜和交联后，可以使用本试剂盒开始检测。下面的检测过程中溶液的用量是用于一片10x10cm膜的量。如果膜较大或较小，各溶液的用量可以按比例放大或缩小。
2. 37-50ºC水浴溶解封闭液和洗涤液。
注意：封闭液和洗涤液必须完全溶解后方可使用，封闭液和洗涤液可以在室温至50ºC之间使用，但必须确保这两种溶液中均无沉淀产生，在冬天需特别注意。
3. 取一合适的容器加入15ml封闭液，再放入交联过的含有样品的尼龙膜。在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动15分钟。
4. 取7.5µl Streptavidin-HRP Conjugate加入到15ml封闭液中(1:2000稀释)，混匀备用。
5. 去除封闭液，加入上一步中配制的15ml含有Streptavidin-HRP Conjugate的封闭液。在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动15分钟。
6. 取25ml 洗涤液(5X)，加入100ml重蒸水或MilliQ级纯水，混匀配制成125ml洗涤液。
7. 将尼龙膜转移至另一装有15-20ml洗涤液的容器内，漂洗1分钟。
8. 去除洗涤液，加入15-20ml洗涤液，在侧摆摇床或水平摇床缓慢上洗涤5分钟。
9. 重复步骤8三次(共洗涤四次)，每次洗涤时间均约为5分钟。
10. 将尼龙膜转移至另一装有20-25ml检测平衡液的容器内，在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动5分钟。
11. 取5ml ECL A液和5ml ECL B液混匀，配制成ECL工作液。注意：ECL工作液必须现配现用。说明：从本步骤起操作方法和注意事项同Western实验的荧光检测。
12. 取出尼龙膜，用吸水纸吸去过多液体。立即将膜的样品面向上，放置到处于水平桌面上的洁净容器内或保鲜膜上。
13. 在尼龙膜的表面小心加上步骤11配制好的共10ml ECL工作液，使工作液完全覆盖尼龙膜。室温放置2-3分钟。
14. 取出尼龙膜，用吸水纸吸去过多液体。将尼龙膜放在两片保鲜膜或其它适当的透光薄膜中间，并固定于压片暗盒(也称片夹)内。
15. 用X光片压片1-5分钟。可以先压片1分钟，立即显影定影，然后根据结果再调整压片时间；也可以直接分别压片30秒、1、3、5分钟或更长时间，然后一起显影定影观察结果。

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