YT202型AP2凝胶迁移突变探针(10μM)销售

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括YT202型AP2凝胶迁移突变探针(10μM)销售在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：YT202型AP2凝胶迁移突变探针(10μM)销售
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：YT202
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－AP2的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

EMSA突变探针－AP2的序列如下：
5"-GAT CGA ACT GAC CGC TTG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG AAC GCC GGG CA-5"

EMSA突变探针－AP2中AP2的公认的结合位点发生了突变，从而使AP2无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和AP2的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和AP2的结合的条带不会被抑制。参考下图。


图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。

储存条件：-20℃，有效期一年。

欲咨询购买YT202型AP2凝胶迁移突变探针(10μM)销售，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：
ARB13079 小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)elisa检测 Mouse retinol-binding protein 4,rbp-4 ELISA KIT
丫啶黄素 Potassium gluconate 8048-52-0
PY04-048 头孢磺啶 0.5 mg/支×10支 每支添加于100ml MUGal(4-甲基伞形酮-β-半乳糖苷)肉汤基础培养基中 ，用于食品、饮料和饮用水的大肠菌群快速检验和计数
BTN81202 真菌总蛋白质微量提取试剂盒 Fungal Total Protein Miniprep Kit
BFD006 猪伪狂犬GE病毒抗体检测试剂盒
ARB12550 大鼠胰淀素(Amylin)ELISA检测服务 Rat amylin ELISA KIT
BL1065 MH(A)培养基
BTN130617 Therminator γ DNA聚合酶 Therminator γ DNA Polymerase
F030501 FITC标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*FITC
ARB12804 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosIdAse)elisa测定使用说明书 Mouse β-glucosidase ELISA KIT
BTN130666 尿嘧啶切刻酶 Uracile Nicking Enzyme
DP412 RNA纯化试剂盒
YT202型AP2凝胶迁移突变探针(10μM)销售关键词：AP2 Mutation Probe For EMSA(10μM),AP2凝胶迁移突变探针(10μM),YT202


·Western二抗稀释液
编号：YT070
英文名称：Western Secondary Antibody Dilution Buffer
规格：100ml
本品可以用于Western时二抗的稀释。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。按照每个二抗稀释10毫升计算，一个包装的Western二抗稀释液可以稀释10个或10次二抗。

注意事项：本Western二抗稀释液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完，如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。

储存条件：4℃，有效期一年。

·Ad-mCherry-GFP-LC3B
编号：YT160
英文名称：adenovirus expressing mCherry-GFP-LC3B fusion protein
规格：1ml|10×1ml
本品是一种可以表达mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒，可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬的检测。

LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族，其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止，LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个氨基酸残基的蛋白，在蛋白合成后，被Atg4所酶切而失去了C端的22个氨基酸蛋白，从而暴露出C端的甘氨酸，人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中，其C端暴露的甘氨酸经过一个类似泛素化的过程，以ATG7为E1样激活酶， 以ATG3为E2样连接酶，以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶，在C端甘氨酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同，LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后，自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切，而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大，但由于其极强的疏水性，在SDS-PAGE电泳时，LC3B II比LC3B I迁移得更快，其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以斑点的形式表现出来。

自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关，在饥饿等不利的环境条件下， 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分，为细胞的生存提供能量及原材料，促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用，自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。

Ad-mCherry-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒，感染后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白mCherry、绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白，呈现明亮的红色和绿色荧光，可以用于细胞自噬的检测。

自噬小体在与溶酶体融合过程中，溶酶体内的酸性环境会导致GFP荧光淬灭，这为追踪GFP-LC3B的细胞定位增加了难度。mCherry是一种来自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的单体红色荧光蛋白，当其与GFP进行LC3B的共同标记时，在GFP被溶酶体酸性环境所淬灭的情况下，可以发出红色荧光的mCherry因为其卓越的稳定性而被保留。因此，通过融合表达mCherry-GFP-LC3B蛋白，可以非常有效地追踪自噬过程。在用Ad-mCherry-GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B以弥散的黄色荧光(mCherry和GFP的综合效果)形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以黄色斑点的形式表现出来(LC3B dot or punctae)；当自噬体与溶酶体融合后，因GFP荧光的部分淬灭而以红色斑点的形式表现出来。

腺病毒感染细胞后为瞬时表达，通常不会与基因组DNA重组，不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后，有效表达时间通常不少于7天，不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。

百奥莱博的Ad-mCherry-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统，感染普通的细胞后不能进行扩增和重组，从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。

本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。

本产品的滴度≥1×108 pfu/ml，使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞，每孔50万细胞计算，共可以感染10个孔；如果按照20 MOI感染24孔板的细胞，每孔10万细胞计算，共可以感染50个孔。如果MOI值提高，则相应可以感染的孔数会减少；如果MOI值降低，则相应可以感染的孔数会增加。

注意事项：
1. 反复冻融会降低病毒滴度，如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后，如果在一周内使用，可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年，可能会导致滴度下降，此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体，请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1)，没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病，可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。

储存条件：-20℃，有效期1～2个月。


YT202型AP2凝胶迁移突变探针(10μM)销售关键词：AP2 Mutation Probe For EMSA(10μM),AP2凝胶迁移突变探针(10μM),YT202

FMOC-D-甲硫氨酸 5′-CDP,Na 112883-40-6
哌嗪-N,N-双(2-乙磺酸) Hydantoin 5625-37-6
次硝酸铋 Aluminum acetate basic 1304-85-4
F040401 乙肝表面抗原 HBSAg
HC0151 切片盒
ARB12499 大鼠神经营养因子3(NT-3)酶免分析 Rat neurotrophin 3,nt-3 ELISA KIT
肝素钠 1-Pentadecanol 9041-08-01
F010205 小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG
PY01-084 脑浸粉(牛) 250克|1公斤
ARB11860 人糖连抗原153(CA153)elisa检测说明书 Human ca153 ELISA KIT
50-23-7
BL1416 "Western blotting(山羊IgG)
腺苷 L-(+)-Tartaric acid disodium salt 58-61-7
F010204 小鼠抗人IgM抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgM
9025-70-1 β-葡聚糖酶 β-Dextranase
精氨酸酶(牛肝) Sebacic acid 9000-96-8
O-乙酰-L-丝氨酸盐酸盐 N-Acetyl-D-mannosamine 66638-22-0
NF-254 冻干羊抗人APO-B血清
ARB13269 小鼠叠氮胸苷(AZT)elisa测定使用说明书 Mouse azidothymidine,azt ELISA KIT
ARB11276 人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA检测服务 Human bone-specific alkphase b,alp-b ELISA KIT
4-氟苯甲酸 Ferrous oxalate dihydrate 456-22-4

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