NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)品牌的品牌：百奥莱博，是优质的凝胶迁移EMSA产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)等凝胶迁移EMSA产品请联系我司咨询订购。

名称：NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)品牌
英文名：NF-κB Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
产地：国产|进口
规格：60μl
编号：YT231
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的NF-κB consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－NF-κB的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

NF-κB consensus oligo的序列如下：
5"-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3"
3"-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5"

EMSA突变探针－NF-κB中NF-κB的公认的结合位点发生了突变，从而使NF-κB无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

我公司的NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)品牌，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·小鼠抗OCT-4抗体
编号：YT747
英文名称：OCT-4 Mouse Monoclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于小鼠的抗OCT-4的单克隆抗体。
宿主：小鼠
克隆性：单克隆抗体
用途：WB,ICC, IF
交叉反应性：人，小鼠
分子量：39KDa
推荐稀释比例：WB(1:1000-1:5000),IF(1:200),ICC(1:200)

About this Antibody
Name	OCT-4 Mouse Monoclonal Antibody
Category	Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody
Isotype	IgG1
Purification	ProA affinity purified
About the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing mice with a recombinant protein corresponding to a region of OCT-4
Gene ID	5460
SwissProt	Q01860
Synonyms	MGC22487; OCT3; OCT4; OTF3; OTF4; OTF-3; Oct-3; Oct-4
Category	Developmental Biology
Background	Oct-4 (POU5F1) is transcription factor that binds to the octamer motif (5"-ATTTGCAT-3"). It forms a trimeric complex with SOX2 on DNA and controls the expression of a number of genes involved in embryonic development such as YES1, FGF4, UTF1 and ZFP206. Oct-4 is critical for early embryogenesis and for embryonic stem cell pluripotency. It is expressed in developing brain and highest levels also found in specific cell layers of the cortex, the olfactory bulb, the hippocampus and the cerebellum .

注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

储存条件：-20℃，有效期一年。


NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)品牌关键词：NF-κB凝胶迁移突变探针,YT231,NF-κB Mutation Probe For EMSA(1.75μM),NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)


·L-亮氨酸脱氢酶
编号：YT551
英文名称：L-leucine Dehydrogenase (Crude Enzyme)
规格：100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的L-亮氨酸脱氢酶，并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液，用于催化L-亮氨酸生成酮酸。

CAS：9082-71-7
外观：半透明黄色溶液
酶促反应：L-leucine + H2O + NAD+ = 4-methyl-2-oxopentanoate + NH3 + NADH + H+
储存条件：-20℃，有效期1个月。

注意事项：
1. 由于本产品需新鲜制备，在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活，所以收到酶液后请根据需要进行分装，并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长，酶活力会有一定程度的下降，收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生，融化后混匀即可，不影响正常使用。

·RNase抑制剂(氧钒核糖核苷复合物)
编号：YT531
英文名称：RNase Inhibitor(RVC)
规格：2ml|10ml
本抑制剂氧钒核糖核苷复合物(Ribonucleoside Vanadyl Complexes, RVC)是一种常用的RNA酶抑制剂，浓度为200mM，广泛用于各种RNA样品的分离纯化和检测过程中以抑制RNA降解。

本产品通过一种优化的方法将四种rNTP的等摩尔混合物与氧化钒混合反应而成，可以和RNase以非共价键结合，形成稳定的复合物，从而抑制RNase活性。

本产品是一种常用的RNase抑制剂，可广泛用于各种需要防止RNA降解的RNA分离、纯化和检测过程。本产品可以用于mRNA的纯化过程中，作为RNase的抑制剂；也可用于细胞裂解和蔗糖梯度法细胞组分分离过程中，以抑制RNase活性；还可以用于原位杂交中保护RNA探针，以及DNase I消化DNA时保护RNA等。但本产品不适合用于体外翻译体系。

本产品可以抑制绝大多数核糖核酸酶，但以下是例外：DNase I、S1 nuclease及Bacillus cereusribonuclease。由于本产品不抑制DNase I，所以当用DNase I消化去除RNA样品中的DNA时，可以采用本产品来抑制RNase。

有报道称0.4mM以上浓度的RVC对PCR聚合酶有一定的抑制作用，所以本试剂不推荐直接用于反转录体系中，反转录体系中可以选用百奥莱博的另外一种RNase抑制剂(YT530)。也可以通过后续提到的方法抽提去除RVC后再用于PCR反应。

很多时候RNA样品中的RVC不必去除，可以直接用于后续的电泳、功能检测等。例如，使用本产品纯化获得的mRNA未经去除RVC，可以直接用于蛙卵的注射实验。

如果需要去除RNA样品中的RVC，可以直接使用等体积苯酚进行抽提。如果苯酚中含有抗氧化剂8-羟基喹啉(8-hydroxyquinoline)，抽提含有RVC的RNA样品后会发现苯酚的颜色会变黑。当苯酚抽提样品2-4次后，苯酚的颜色不再明显变色，提示RVC已经被充分去除了。也可以在RNA沉淀前，加入RVC的摩尔数10倍量的EDTA以充分分解和失活RVC，这样可以在RNA沉淀时去除已经分解和失活的RVC。RVC浓度越高，对于RNase的抑制效果越强。参考图1，20mM的RVC可以完全抑制0.00025U/ml的RNase A。本产品浓度为200mM，一般细胞裂解液中推荐使用终浓度20mM，也可以根据经验或文献选择不同的浓度。每一批的本产品都经过RNase活性抑制的检测，检测结果参考下图。


不同浓度的RVC对RNase A的抑制效果图。总RNA和0.00025U/ml RNase A以及指定浓度的RVC一起孵育20分钟后进行电泳检测。本图仅作参考，不同的样品不同的检测条件，实际获得的结果可能和上图有所差别。

注意事项：
1. 第一次使用时建议分装，避免反复冻融。
2. 去垢剂SDS以及螯合剂EDTA可以抑制RVC的活性，请勿和RVC同时使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。


NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)品牌关键词：NF-κB凝胶迁移突变探针,YT231,NF-κB Mutation Probe For EMSA(1.75μM),NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)


·DNA寡核苷酸退火缓冲液(5X)
编号：YT483
英文名称：Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)
规格：1ml
本品是一种经过我们多次实验证实、可以用于DNA oligo退火的缓冲液。该退火缓冲液不仅可以用于常规的DNA oligo的退火，而且特别适合于较难退火的用于RNAi(也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。用于RNAi质粒构建的DNA oligo通常由于含有约20个左右的互补序列，极易自身形成发夹结构，从而影响两条DNA oligo的正确退火。使用百奥莱博的Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)，可以有效避免DNA oligo自身形成发夹结构，并且两条oligo退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。

使用本品操作非常简单，只需把待退火的DNA oligo和Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)按照一定比例混合后，置于PCR仪上，约90分钟即可完成。如果一次退火反应体积为100微升，一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。

使用说明：

1. 把待退火的DNA oligo用经灭菌的MiliQ水或重蒸水配制成50μM。溶解Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)，混匀备用。

2. 如下设置退火反应体系：
Nuclease-Free Water——>40µl
Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)——>20µl
DNA oligo A (50µM)——>20µl
DNA oligo B (50µM)——>20µl
按照上述顺序依次加入各种试剂，混匀。如果所用的PCR仪没有热盖，滴加矿物油(mineral oil)以防止蒸发。

3. 如下设置PCR仪进行退火反应：

步骤	温度	时间	说明
1	95℃	2分钟	让oligo充分变性
2	每8秒下降0.1℃，降至25℃(注1)	约90分钟	退火
3	4℃	长时间保持	暂时存放

注1：如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能，也可以设置为每90秒下降1℃。

4. 退火结束后可以直接用于连接反应，也可以-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应，最好用纯化试剂盒进行纯化，或者确保退火产物在反应体系中体积不超过5%，以避免Annealing Buffer对后续的酶反应体系的干扰。

储存条件：-20℃，有效期一年。

我公司正在火爆促销凝胶迁移EMSA系列产品，欢迎您的垂询选购NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)品牌。