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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pGEX-Zsgreen1
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pGEX-Zsgreen1
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0217 | pGEX-Zsgreen1 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | Tac/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体;pGEX系列表达质粒 |
| 质粒标签: | N-GST,N-Zsgreen1 |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | 大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG |
| 3'测序引物: | pGEX3: CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG |
| 备注: | 可用GST亲和柱纯化重组蛋白 |
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文献和实验调节因子的辅助报告基因实验中。一般, 我们建议在将要应用的目标细胞中验证一个特定辅助报告基因的性能。 PGL4.29 amp PGL4.26 amp PGL4.51 amp PGL4.75 amp 5)、原核表达载体(Novagen): pGEX4T-1 pGEX4T1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体 pGEX4T-3 pGEX4T3 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体 pGEX6P-1 pGEX6P1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体 pET21
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶?成像和定量根本不是一回事
。两者也能组合——例如用 EGFP 做分选、用 Luciferase 做定量,各司其职。 项目落地前,再确认这一步 如果既想看定位又想定量,别在"二选一"上纠结,直接双标:荧光蛋白负责成像、荧光素酶负责读数。顺带一句,多报告基因载体在组合实验里省事很多——比如同一个慢病毒骨架上带 EGFP 标记加 Luciferase 定量,转进去一次就两头兼顾。还有些项目需要红绿多通道,那就提前规划好 mCherry / ZsGreen1 的搭配,避免后面串色返工。 再回答几个容易混淆的问题 要成像看定位选荧
今天进行了GST融合蛋白的表达,pGEX-4T-1载体,BL21菌。 步骤:摇菌至A600:0.7,然后加IPTG诱导3小时,温度35度(终浓度:0.3mM),取1ml诱导后菌,离心去培养基,冰冷PBS洗一次,离心,吸净液体,加入1*上样缓冲液50微升和终浓度1mM PMSF,100度煮菌5分钟,离心,取20微升上清跑胶。结果如图。 1.空载体对照有GST的表达 2.所有重组载体同样有GST大小的片断,(箭头 B) 3.箭头A所示的条带在空载体和重组载体处有明显差异。 4.我的目的
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