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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pGEX-Zsgreen1
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pGEX-Zsgreen1
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0217 | pGEX-Zsgreen1 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | Tac/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体;pGEX系列表达质粒 |
| 质粒标签: | N-GST,N-Zsgreen1 |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | 大肠杆菌 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG |
| 3'测序引物: | pGEX3: CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG |
| 备注: | 可用GST亲和柱纯化重组蛋白 |
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文献和实验调节因子的辅助报告基因实验中。一般, 我们建议在将要应用的目标细胞中验证一个特定辅助报告基因的性能。 PGL4.29 amp PGL4.26 amp PGL4.51 amp PGL4.75 amp 5)、原核表达载体(Novagen): pGEX4T-1 pGEX4T1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体 pGEX4T-3 pGEX4T3 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体 pGEX6P-1 pGEX6P1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体 pET21
今天进行了GST融合蛋白的表达,pGEX-4T-1载体,BL21菌。 步骤:摇菌至A600:0.7,然后加IPTG诱导3小时,温度35度(终浓度:0.3mM),取1ml诱导后菌,离心去培养基,冰冷PBS洗一次,离心,吸净液体,加入1*上样缓冲液50微升和终浓度1mM PMSF,100度煮菌5分钟,离心,取20微升上清跑胶。结果如图。 1.空载体对照有GST的表达 2.所有重组载体同样有GST大小的片断,(箭头 B) 3.箭头A所示的条带在空载体和重组载体处有明显差异。 4.我的目的
!希望大家多讨论一下给我点经验和建议,谢谢大家啦! kinguangjun 你好!要增加可溶性,可以换成为能增加可溶性表达的载体来试试,例如pGEX-4T-1或pET32a(+)等,如果还是不行,可能只能用真核表达系统啦! woxingwosu kinguangjun wrote: 你好!要增加可溶性,可以换成为能增加可溶性表达的载体来试试,例如pGEX-4T-1或pET
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