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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pRSET-CFP
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pRSET-CFP
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0916 | pRSET-CFP | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | T7 |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,F1 ori |
| 终止子: | T7 terminator |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体;pRSET系列表达质粒 |
| 质粒大小: | 3600bp |
| 质粒标签: | N-His,N-EK,N-Xpress |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | BL21(DE3)系列,推荐BL21Star(DE3) |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | T7 Forward: 5-TAATACGACTCACTATAGGG-3 |
| 3'测序引物: | 根据序列设计 |
| 备注: | pRSET表达质粒 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验基因表达,比如转录因子,这样,这类蛋白就没办法通过酵母双杂交进行筛选和验证相互作用了(当然也可以将该蛋白换至 AD 载体上,但是依然有其局限性)。荧光共定位,Fluorescenceco-localization,在过去,这个技术一般用于细胞内辅助证明蛋白相互作用,前些年,如果是其他物种的蛋白质,你应用酵母双杂交系统验证了它们的相互作用,reviewer 可能会说你这个并不能反映原物种中的真实情况,可能是假阳性。这个时候,一些研究者就将这两个蛋白分别与不同颜色的荧光蛋白融合表达于原物种细胞当中,在高分辨显微
基因表达,比如转录因子,这样,这类蛋白就没办法通过酵母双杂交进行筛选和验证相互作用了(当然也可以将该蛋白换至 AD 载体上,但是依然有其局限性)。【二】荧光共定位,Fluorescenceco-localization,在过去,这个技术一般用于细胞内辅助证明蛋白相互作用,前些年,如果是其他物种的蛋白质,你应用酵母双杂交系统验证了它们的相互作用,reviewer 可能会说你这个并不能反映原物种中的真实情况,可能是假阳性。这个时候,一些研究者就将这两个蛋白分别与不同颜色的荧光蛋白融合表达于原物种细胞当中,在高分
步骤 1. 载体的构建 pA7- CFP- AtCOP1,pA7-AtCRY1-YFP pA7- CFP-OsCOPl,pA7-OsCRY1b-YFP 中间载体pA7-CFP和pA7-YFP为本实验室构建。将AtCOPl(引物为AtCOP1XhoI5' 和AtCOP1 SpeI3')和AtCRYl(引物为AtCRY1XhoI5'和AtCCT1SpeI3')分别用高保真聚合酶(pfu ultra)进行PCR扩增,纯化PCR产物,用XhoI/SpeI双酶
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