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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pVSV-G
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μg
pVSV-G
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0263 | pVSV-G | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | CMV,T7 |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,SV40 ori |
| 终止子: | β-globin poly(A) signal |
| 质粒分类: | 病毒系列,逆转录病毒包装载体 |
| 质粒大小: | 6363bp |
| 质粒标签: | VSV-G |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37℃,有氧 LB |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导,瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。 (2)服务流程 1)含目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和纯化提取; 2)慢病毒干扰载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染293T细胞; 3)培养48~72h,收集培养上清; 4)病毒的纯化和浓缩(超离和/或超滤); 5)滴度测定、目的基因检定 6)将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞,筛选混合稳定细胞株,并检测靶基因的表达。 客户提供 1)表达miRNA/shRNA的质粒(提供测序图谱)或所要
克隆载体 pRCII 转入大肠杆菌为例。TA 克隆载体 pRCII 含有 LacZ 基因,多克隆酶切位点位于其间,当没有外源基因插入 LacZ 基因中时,LacZ 基因的启动子可使此基因编码半乳糖苷酶,从而催化底物 X-gal 发生化学反应,菌落变成蓝色;当外源基因与 pRCII 载体发生连接时,LacZ 基因失活,菌落呈白色;同时该质粒还含有氨苄青霉素耐药基因。根据此特性,白色菌落含有重组质粒。在用这种质粒进行克隆时,转化平板培养基中要加入 0.5 mM IPTG、50 g/mL 氨
突变和化学修饰的耐受性,认为siRNA的5’端相对于3’端具有对突变的较高耐受性。有学者认为正义链3’突出端的任何碱基修饰对siRNA作用效果均无明显影响。还有学者认为与反义链互补的正义链3’端发生1—4个碱基的错配反而有助于增强RNAI的活性。二、siRNA制备方法目前为止较为常用的5种制备siRNAs的方法包括化学合成体外转录长片断dsRNAs经RNase III 类降解 (e.g. Dicer, E. coli, RNase III)siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达siRNAsPCR制备
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