腔肠素e 报告基因检测

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北京百奥莱博专业生产供应腔肠素e 报告基因检测，我公司销售全品类的细胞生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：腔肠素e 报告基因检测
英文名：Coelenterazine e
品牌：百奥莱博
编号：SY0241
产地：国产|进口
本品为粉末形式供应的腔肠素e（Coelenterazine e），一种天然腔肠素衍生物，结构上比天然腔肠素多了一个乙基。作为海肾荧光素酶的底物，其荧光强度是天然腔肠素的137%。腔肠素e具有最高的体外水母发光蛋白反应性，且具有双发射峰（405& 465），从而可在pCa 5-7范围内通过双波长的比例测定Ca2+浓度，由于该法不依赖于腔肠素浓度，因此提高了检测精确性。但对于细胞内相关实验则无此优势，因为该衍生物的细胞通透性较差。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂；虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：e-CTZ; e Coelenterazine
CAS：114496-02-5
分子式：C28H23N2O3
分子量：449.5
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不溶于DMSO
外观：黄色至橘色固体
纯度：≥95%（TLC）
结构：


注意事项
1） 腔肠素e粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成腔肠素e氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

更多有关腔肠素e 报告基因检测的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：
麦芽糊精 Super low range protein MW marker 9050-36-6
PY08-009 哥伦比亚血琼脂平板 9CM 10皿/盒，用于对营养苛求菌的培养
BL1423 SYBR Green Ⅱ(10000×)
C1601 驴血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
二乙三胺五乙酸 N-Acetylneuraminic Acid Aldolase 67-43-6
ARB13344 牛β-乳球蛋白(β-lActoglobulIn)血清中含量检测
F010207 小鼠抗鸭IgG(IgY)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgG(IgY)
PY02-148 DNA酶甲基绿琼脂基础 100克
ARB14216 人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)定量分析
ARB12349 大鼠尿激酶(UK)Elisa方法检测 Rat urokinase,uk ELISA KIT
F040102 鸡卵清蛋白偶联克伦特罗 OVA-CLE
溶葡球菌酶 Sodium iodoacetate 9011-93-2
ARB11221 人细胞角蛋白20(CK20)elisa检测 Human cytokeRatin 20,ck20 ELISA KIT
A9016-32 兔血清Rabbit Serum
ARB12631 大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)酶免分析 Rat high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
ARB11597 人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)尿液中含量检测 Human receptor for advanced glycation end products, rage/ager ELISA KIT
PY01-042 牛磺酸 25克
BL1150 D-PBS，液体，不含钙、镁和酚红
BL0772 (66-669)高分子量 marker Protein mixture(原装)
ARB12191 大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)代做ELISA实验 Rat activated leukocyte cell adhesion molecule,alcam ELISA KIT
腔肠素e 报告基因检测关键词：e-CTZ, e Coelenterazine,腔肠素e


·Alexa Fluor 488标记驴抗山羊IgG(H+L)F(ab)2片段
编号：SY0735
英文名称：Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab)2 fragment Donkey Anti-Goat IgG (H+L)
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 488标记的驴抗山羊IgG（H+L）F(ab)2片段，是将驴抗血清经胃蛋白酶消化并使用抗原偶联的琼脂糖微珠亲和色谱纯化所得，借此可去除Fc片段和完整IgG分子。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的山羊IgG分子，也会与其他山羊免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括鸡、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠的血清蛋白经过亲和吸附处理，ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应。但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会与非免疫球蛋白类的血清蛋白发生交叉反应。

Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC，Amax（最大激发波长）为493nm，Emax（最大发射波长）为519nm。本品适合做多标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸钠，0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：Alexa Fluor 488, Amax=493, Emax=519
防腐剂：0.025% 叠氮化*(代"钠")
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


腔肠素e 报告基因检测关键词：e-CTZ, e Coelenterazine,腔肠素e


·MBP标签蛋白高度交联纯化树脂
编号：SY0401
英文名称：Dextrin Agarose Resin 6FF
规格：5ml
本品是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白（MBP）标签蛋白的亲和层析介质，MBP可促进连接蛋白的正确折叠，增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白，结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱，保护了目的蛋白的活性，MBP融合部分后续可用位点特异性蛋白酶切除。

此外，本品以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质，具有更高的物理化学特性，可以耐受更高的压力，在相对较高的流速下，实现对目的蛋白的纯化，更适于工业大规模蛋白的纯化。

基质（Matrix）：高度交联的6%琼脂糖微球
配体（Ligand）：糊精
孔径（Bead size）：45-165µm
载量（Capacity）：＞10mg MBP蛋白（80kDa）
最大压力（PressureMax）：0.3 MPa, 3bar
pH稳定范围：3-12
储存缓冲液：20%乙醇
储存条件：4℃，有效期2年

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