- ￥856
- 碧云天（beyotime）
- RG029S
- 2026年01月21日
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- 文献和实验
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100次
为提高检测结果的准确性，Renilla luciferase常常被用作转染效率的内参，以消除细胞数量和转染效率的差异，此时就需要能够同时精准检测两种萤光素酶活性的试剂盒产品。 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)与此前上架的双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)类似，是先以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)活性，后以肠腔素(coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla luciferase)活性的试剂盒。
二者检测效果完全一致，RG027/RG028中的萤火虫萤光素酶检测试剂为即用型液体，无需配制即可直接使用，检测更方便。RG029为RG027/RG028的冻干粉版本，在-20℃保存非常稳定。
产品特点：
发光强度高：对于相同的样品，萤火虫萤光素酶的检测，本产品的发光效果比国外同类产品(Competitor P)高约30-45%；海肾萤光素酶的检测，本产品的发光效果比国外同类产品(Competitor P)高约20-30%；
检测速度快：本产品操作简单，读数稳定，从样品制备到完成整个检测过程仅需25分钟，且化学发光比较稳定，萤火虫萤光素酶的信号半衰期约15分钟，海肾萤光素酶的信号半衰期约200秒；
检测效果好：本产品中的海肾萤光素酶检缓冲液和海肾萤光素酶检测工作液含有抑制萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的物质，该物质可抑制99.9%以上的萤火虫萤光素酶催化的发光信号，大大提高了后续海肾萤光素酶活性检测的精准性；
稳定性好：萤火虫萤光素酶检测试剂II反复冻融5次对检测效果基本无影响，反复冻融10次检测效果下降不超过10%；海肾萤光素酶检测缓冲液反复冻融10次、4℃或室温保存3天对检测效果基本无影响，37℃保存1天对检测效果的影响不超过5%；海肾萤光素酶检测底物(100X)在4℃保存1周、室温保存1天检测效果下降不到10%，室温保存3天、37℃保存1天，仍可保留80%以上的活力。
检测效果：
图1. 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)的检测效果对比图。本试剂盒与碧云天生产的双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)的检测效果完全一致。图中所示为本产品和国外同类产品(Competitor P)对共转染阳性萤火虫萤光素酶报告基因质粒和海肾萤光素酶报告基因质粒的HeLa细胞裂解样品的检测效果。图A为整体检测效果对比图，图B为萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶的化学发光强度的检测效果对比图，图C为萤火虫萤光素酶的化学发光稳定性的检测效果对比图，图D为海肾萤光素酶的化学发光稳定性的检测效果对比图。
除了选用海肾萤光素酶作为内参外，也可以选择转入β-半乳糖苷酶报告基因质粒作为内参，然后采用β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)进行检测。
除了检测试剂盒，此次我们也为大家带来了相关细胞裂解液产品！
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文献和实验、RNA剪接研究。 萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响，而双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供一基准线，从而可以在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响，使得数据结果更为可信。Dual-Luciferase®双萤光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶，两者没有种源同源性并对应不同的反应底物，故而没有交叉干扰。得益于超强的光
。实验报告基因用于测试实验条件下基因的表达，而对照报告基因作为内对照，以使实验报告基因测试的结果归一化。作归一化可消除实验过程中减弱实验准确度的变化，如培养细胞的数量、细胞转染 及裂解的效率等。在研究转录调控启动子活性中，具体实验步骤如下。 1. 质粒转染细胞 1) 细胞 铺板：将细胞按70%的汇合度接种到96孔板。 2) 转染：16h后转染萤光素酶报告基因 质粒和RNA，每个样品设置6个复孔 a) 配制DNA和转染试剂 : 96孔板转染质粒时
β-Gal或GUS表达, 不利于准确定量报告基因的表达, 采用高温下预处理细胞裂解液可降低内源性β-Gal和CAT的干扰，但这些处理也会快速失活荧光素酶。因此,在此类双报告基因检测中, 必须以不同的步骤分别处理共转染的细胞裂解液，相当麻烦。 双萤光素酶报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶检测和海洋腔肠荧光素酶检测，可在单管中进行双荧光素酶报告基因检测,快速,灵敏,简便。但是早期的双萤光素酶技术需要先裂解细胞，检测萤火虫萤光素酶，然后淬灭萤火虫萤光同时激活海肾萤光素酶，再做第二个检测
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