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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
375
- 英文名:
Luciferase Reporter Gene Assay Kit
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
未拆封试剂盒-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒厂家价格,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒厂家价格
规格:100T|500T|1000T
品牌:百奥莱博
英文名:Luciferase Reporter Gene Assay Kit
产地:国产|进口
编号:SY0058
报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。本萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit),是通过萤火虫荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶。荧光素酶在 Mg2+和 O2 参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin,在荧光素的氧化过程中,发出生物荧光(bioluminomescence),然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物荧光。
产品特点
1)简便,快捷。
2)灵敏度高,可检测10-20 mol的荧光素酶。
3)安全,非放射性。
4)酶的浓度线性范围可达8个数量级。
产品组份:
| 组分 | 100T | 500T | 1000T |
| 细胞裂解液 | 60ml | 60ml×5 | 60ml×10 |
| 萤火虫荧光素酶检测试剂 | 10ml | 10ml×5 | 10ml×10 |
保存:未拆封试剂盒-20℃避光保存,有效期为 6 个月。-70℃避光保存,有效期为一年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)避光保存,不能反复冻融。
实验步骤
1. 细胞裂解:
1)将转入报告基因的细胞中的培养基移除,加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液(Cell lysis buffer),然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min,充分裂解细胞。
| 细胞培养板 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
| 细胞裂解液(µl/孔) | 30µl | 60µl | 120µl | 250µl | 500µl |
【注】:裂解产物可室温保存6h,4℃保存16h,-70℃可长期存放。(裂解产物不能多次反复冻融)。
2)将充分裂解后的裂解产物,10000-15000rpm离心3-5min。离心后将上清液移入新的EP管中进行后续检测。
2.荧光素酶检测:
1)按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开,设定参数,测定时间为10s,测定间隔为2s。
2)将样品按照20~100µl的体积(如果样品量足够,请加入100µl)加入测量管中(保持每次样品的加样量一致),另外加入萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)混匀 2-3 次(不能漩涡混匀),充分混匀后测定RLU(Relative light unit),同时设置细胞裂解液(Cell lysis buffer)为对照孔。
注意事项
1)温度会对酶的活性会产生影响,因此所有试剂应放置室温后再使用。
2)如用单管荧光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
3)萤火虫荧光素酶催化的生物发光的最强发光波长为 560nm。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
更多有关北京萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒厂家价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·Alexa Fluor 594标记驴抗兔IgG(H+L)
编号:SY0727
英文名称:Alexa Fluor 594 AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的驴抗兔IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的兔IgG分子,也会与其他兔免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、大鼠、绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理,ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应。但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red,Amax(最大激发波长)为591nm,Emax(最大发射波长)为614nm。本品适合做多标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
荧光素:Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
北京萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒厂家价格关键词:Luciferase Reporter Gene Assay Kit,萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒,SY0058
·Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
编号:SY0600
英文名称:Cy3 NHS Ester
规格:1mg
Cyanine 3(Cy3),是花青素荧光素染料家族的成员之一,是化学合成的聚甲炔染料。目前Cyanine系列染料以两种异构体的形式供货,一种是非磺化花青素(non-sulfonated cyanines),一种是磺化花青素(sulfonated cyanine)。两者的光谱性质几乎一致,因此大部分应用可相互替换,比如,都可用于标记DNA或蛋白等生物分子。两者的主要区别在于:磺化染料是水溶性的,在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂,并且降低染料在水中聚集的可能性,增强标记效率。
本Cyanine 3(Cy3)是以磺化染料的形式供货,易溶于水,Ex=555 nm,Em=565 nm,具有明亮荧光,光稳定性强,pH非敏感性等优点,适用于标记多肽、蛋白以及核酸等生物分子,以通过后续荧光成像以及其他荧光生物学方法分析目的蛋白。
本Cy3 NHS ester,即含N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide)活化基团的Cy3,可直接与生化分子上的*基(-NH2)反应形成稳定的酰胺键,主要是伯胺。
英文别名:Cyanine 3, monosuccinimidyl ester
分子量:829.03
外观:紫色固体
Ex/Em:555nm/565nm
溶解性:溶于DMSO,DMF,水
储存条件:-20℃,有效期12个月
结构式
北京萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒厂家价格关键词:Luciferase Reporter Gene Assay Kit,萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒,SY0058
ARB12715 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)elisa检测说明书 Rat phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,ampk ELISA KIT
ARB10392 人可溶性半乳糖苷结合凝集素3(LgAls3)ELISA代测服务 Human lectin-galactose binding-soluble 3,lgals3 ELISA KIT
ARB12752 小鼠c-jun elisa检测操作说明书 Mouse c-jun ELISA KIT
BL1246 MTT溶液(0.5%)
PY04-069 *啶酮酸 2.25mg/支×10支 每支添加于225mlFraser增菌液中制成FraserⅠ培养基,用于李斯特氏菌选择性增菌培养
ARB13476 鸡转化生长因子β1(TGF-β1)代做ELISA实验 Chicken transforming growth factor β1,tgf-β1 ELISA KIT
CYB162010 兔抗小鼠血请(抗血清) 0.5ml
偶氮脒类引发剂V50 Diphenylamine Sulfate 2997-92-4
CC0801 高效感受态细胞制备试剂盒
Gram碘液 100ml
NF-251 冻干羊抗人Tf血清
BL0921 RBITC标记羊抗人C3抗体
ARB10574 人成纤维细胞生长因子18(FGF-18)ELISA代测服务
110-16-7 Maleicacid 马来酸
BL1403 固相RNase清除剂
N-乙酰-D-脯*酸 Bromothymol blue sodiu*(代"m") salt 16395-58-7
ARB12296 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)elisa检测操作说明书 Rat anti-thyroid-peroxidase antibody,tpo-ab ELISA KIT
离子交换剂Ⅲ Z-D-Pro-OH
羟基乙酸 Polyamide 79-14-1
L-精*酸L-天冬*酸盐 Phosphotungstic acid hydrate 7675-83-4
F030832 BIOTIN标记小鼠抗猪IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Pig IgG*BIOTIN
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文献和实验好像现在比较常用的是双报告基因检测吧,可以解决你说的问题 huxueliang 利用双荧光素酶报告基因系统 同时转入内参质粒 天飒 huxueliang 麻烦你讲讲利用双荧光素酶报告基因系统 ,同时转入内参质粒吧,我是一名新手这方面知道的少,谢谢啦! 叮当儿 promega公司的双荧光素酶标记系统,好多人都在用,同时转入要检测的报道基因及Renillia,操作的话说明
光素酶在生物体内得到持续表达,注射底物后与表达的荧光素酶反应发光。(自发光,其信号的发射不需要外部光源激发)。目前,比较常用的是萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。 优势: 低背景,避免了小鼠自发荧光的干扰和减少了外界激发光源的干扰 高灵敏度,皮下少量的发光标记肿瘤细胞也可被检测到。如,AniView 100 在实际应用中,可检测到皮下至少 100 个发光标记的肿瘤细胞,但检测到的最少细胞数量与单个细胞的发光强度有关。 不足之处: 标记手段单一,只能通过转基因形式标记细胞、基因 标记物单一,目前主要
生物发光是一种依赖于酶和底物的相互作用来产生光的化学过程。所需的酶被称为荧光素酶,底物因荧光素酶的类型而不同(如荧光素)。 常用荧光素酶信息表: 其中最有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶,分别命名为萤火虫荧光素酶(FLuc)和海肾荧光素酶(RLuc),同时近年来研究得较多的是来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶(GLuc)。 萤火虫荧光素酶(FLuc)作为最通用和最常见的报告基因,该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性,可用于原核和真核细胞。FLuc
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