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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃保存,避光和
- 保质期:
长期
- 英文名:
TCEP Hydrochloride
- 库存:
244
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1g
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
TCEP·HCl多少钱的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多TCEP·HCl等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:TCEP·HCl多少钱
产地:国产|进口
规格:1g
编号:SY0361
英文名:TCEP Hydrochloride
本品适用于凝胶电泳以及固相金属离子亲和层析(IMAC)的准备步骤,用作还原剂来破坏蛋白内或蛋白间的二硫键。也特别适用于马来酰亚胺偶联半胱氨酸残基反应,它能够预防半胱氨酸残基形成二硫键,也不会像DTT或β-ME,本身易与马来酰亚胺反应。RNA分离实验也常用于组织匀浆步骤。
三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP hydrochloride, TCEP·HCl)是一种不含硫醇基且无臭的化合物,广泛应用于生物化学和分子生物学中,用作多肽或蛋白质的二硫键还原剂。与其他类似的还原剂如二硫苏糖醇(DTT),β-巯基乙醇(β-ME)相比,TCEP·HCl 具有多种优点:1)无异味——实验台上使用即可,勿需通风橱;2)稳定性高——化合物本身结构的稳定性使得在操作、使用以及保存的过程中不需要做任何预防措施来避免氧化发生。不会挥发,室温反应即可。室温稳定,抗空气氧化。水溶性缓冲液,酸液以及碱液中稳定。不会与蛋白中的其他功能基反应;3)pH工作范围广——几乎溶于任何pH值的水溶性缓冲液,pH有效工作范围为1.5-9.0。直接溶于水后的pH值约为2.5;4)还原性强——对于大部分实验,5-50 mM TCEP·HCl即可提供足够的摩尔力,于室温条件作用几分钟来充分还原二硫键;5)兼容性广——不含有硫醇基,进行下游的巯基修饰实验如马来酰亚胺偶联不需要提前去除此还原剂。
中文别名:TCEP盐酸盐;三(2-酰乙基)磷盐酸盐;三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐
英文别名:Tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride
CAS:51805-45-9
分子式:C9H15O6P·HCl
分子量:286.7
密度(Density):1.041 g/mL at 25 ℃
外观:白色晶体
熔点:177℃
溶解性:溶于水(50mg/mL)
纯度:>99%
储存条件:2~8℃保存,避光和避潮
结构式:

注意事项
1) 本品在磷酸盐缓冲液中,尤其是中性或碱性pH条件下,不是特别稳定。因此若要在PBS缓冲液中使用本品,工作液必须现配现用。
2) 本品在溶液中带电荷,因此不适用于等电聚焦实验。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
关于TCEP·HCl多少钱的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·一步法(快速/无缝)克隆试剂盒
编号:SY0279
英文名称:One Step Pcr Cloning Kit
规格:25T
一步法(快速/无缝)克隆试剂盒是一款简单、快速、高效的DNA定向克隆产品,该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点,可高效克隆50 bp~10 kp片段。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp~20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合,在重组酶Exnase的催化下,仅需反应30 min即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆,极大的简化了实验步骤。
试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶Exnase,Exnase中添加了独特的重组增强因子,显著提高重组克隆效率,即便使用低效率感受态细胞 (107 cfu/μg)也可实现高效克隆 (100 cfu/ng Vector),而且Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。
一步法(快速/无缝)克隆试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。
产品组份:
5×CE Buffer——————100μl
Exnase——————50μl
500 bp control insert (25 ng/μl)——————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl
实验流程概览
1) 线性化克隆载体制备;
2) 插入片段扩增引物设计;
3) 插入片段PCR扩增;
4) 进行重组反应;
5) 反应产物转化、涂板;
6) 克隆鉴定。

图一 实验流程概览
注:插入片段PCR扩增时,引物5’端引入线性化克隆载体末端同源序列 (图中以蓝色和橙色标记),使得扩增产物5’和3’最末端序列分别和线性化克隆载体两末端序列完全一致。
TCEP·HCl多少钱关键词:TCEP盐酸盐,三(2-酰乙基)磷盐酸盐,TCEP·HCl,三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐
·1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)
编号:SY0321
英文名称:1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
规格:100ml
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液(1×),裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
注意事项
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 培养细胞样品:
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂,使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】:请根据实验情况选用酶抑制剂。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂,使PMSF的最终浓度为1mM。
【注】:请根据实验情况选用酶抑制剂。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
TCEP·HCl多少钱关键词:TCEP盐酸盐,三(2-酰乙基)磷盐酸盐,TCEP·HCl,三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐
·25×TAE预混粉末
编号:SY0262
英文名称:25×TAE Premixed Powder
规格:1pk
TAE即Tris acetate-EDTA buffer,是常用的DNA电泳缓冲液。
25×TAE Premixed Powder(预混粉末)可以配制40L 1×TAE工作液。使用时,可先用蒸馏水配制1L 25×TAE浓缩液。
产品组分
1×TAE工作液中含有40 mM Tris base,40 mM Acetate和1mM EDTA,pH8.2-8.4 (25 ℃)。
运输与保存方法
室温运输。18~25℃干燥储存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
·Alexa Fluor 647标记链霉亲和素
编号:SY0745
英文名称:Alexa Fluor 647 Streptavidin
规格:100μl
本品是Alexa Fluor 647标记的链霉亲和素,该荧光基团Amax(最大激发波长)为651nm,Emax(最大发射波长)为667nm。建议工作液浓度:0.5-2µg/ml(For most applications)。
链霉亲和素是一种来源于阿维丁链霉菌(streptomyces avidinii)的生物素结合蛋白,其非特异性结合远比亲和素低,且与蛋清亲和素在中性pH值具有净正电荷和包含大约7%的碳水化合物相比,链霉亲和素蛋白具有在中性pH值几乎没有净电荷,不含有碳水化合物等更有利的化学性质,所以它被广泛用来作为抗生物素蛋白的替代品。
链霉亲和素浓度:0.9mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸钠,0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶)
荧光基团:Alexa Fluor 647,Ex/Em=651nm/667nm
防腐剂:0.025% 叠氮化*(代"钠")
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品,欢迎来电咨询选购TCEP·HCl多少钱。
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文献和实验4℃ 25℃ 37℃ 8.1 7.5 7.2 8.
:dextrose、L-arginine HCl、Difco PPLO broth (Difco 0554-17-1) horse serum、15% yeast extract solution (autoclaved)、Bacto agar、无菌有盖螺旋试管(autoclaved)、无菌培养皿﹙60x15mm﹚、L-玻棒、37℃培养箱、厌氧缸(厌氧缸长期培养易有污染,所以厌氧包应用无菌水,每次打开厌氧缸后,用70% ethanol擦拭内壁。) · 培养基制备:基本配方为Difco PPLO broth
【原理】硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐: 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。【仪器与用具】分光光度计;真空抽气
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