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- 美国
- AC0057
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Y187 Strain
- 库存：
20
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
株
Y187酵母双杂交菌
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文献和实验1)，保存甘油菌(方法见 2.2)。将甘油菌扩增并保存到96 孔板(Corning Incorporated costar 3599)中，每 个孔对应一条小文库基因，-80℃冻存备用。 2) 将Y190 菌液(携带pGB-诱饵基因质粒)平铺在15cm 培养皿中, 用96 孔 第二章 酵母双杂交筛选 13 replicator(sigma)影印到15cm SD/-Trp 平板上。 将Y187 菌(携带pACT2-小文库基因质粒)用96 孔replicator 从96 孔板中
细胞增殖，增加筛选工作量。培养酵母菌Y2HGold/pGBKT7- CaM(SD/-Trp)时，出现了酵母菌种从第四天开始出现变红的情况，查找资料得知是由于酵母菌在缺乏腺嘌呤的生长环境中，产生红色代谢物的导致的。因而应尽量缩短此步的培养时间。本项目用变红的菌进行下一步的步骤，实验结果并没有受影响，且变红的菌在腺嘌呤丰富的YPDA液体培养基中培养时，后代菌种恢复白色。综上，酵母培养时间的控制是酵母双杂交实验成功的关键。
的功能蛋白编码基因，验证反式转录调控因子的DNA结合结构域，准确定位参与特定蛋白质结合的核苷酸序列。 酵母单杂交用的cDNA文库用什么试剂盒构建? 单杂交文库可以用酵母双杂交试剂盒中的SMART试剂盒来构建 用BD公司的酵母单杂交文库构建和筛选试剂盒进行酵母单杂交文库的构建。具体操作步骤为：在15 mL试管中依次加入如下成分：20 μL SMART cDNA、6 μL pGADT7-Rec2(0.5 μg/μL，SmaI-线性化)、5 μg pHIS2-PBE
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