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- 库存:
大量
- 英文名:
ET12567/pUZ8002
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
低温运输,-80℃保存
- 规格:
500ul甘油菌
| 菌株类型: | E.coli |
|---|---|
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: | F- dam-13::Tn9 dcm-6 hsdM hsdR zjj-202::Tn10 recF143 galK2 galT22 ara-14 lacY1 xyl-5 leuB6 thi-1 tonA31 rpsL136 hisG4 tsx-78 mtl-1 glnV44 |
| 抗性: | 25 µg/ml 氯霉素和25 µg/ml 卡那霉素 |
| 质粒转化条件: | 42 ℃热激/ 电转 |
| 应用: | 链霉菌基因操作 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| LM1130 | ET12567/pUZ8002 | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
ET12567(pUZ8002)在培养的过程中加入25 µg/ml 氯霉素和25 µg/ml 卡那霉素有助于维持细胞内的伴侣质粒存在。
ET12567(pUZ8002)主要用来进行链霉菌基因操作过程中,利用结合转移的方法将基因导入到链霉菌中,链霉菌基因敲除或者基因倍增过程中全球通用和认可的菌株。
ET12567(pUZ8002)是甲基化缺陷型菌株。大部分链霉菌能够通过甲基修饰系统区分出自身DNA和外来DNA,所以需要转入到链霉菌中的质粒都必须利用ET12567(pUZ8002)通过结合转移的方法进入链霉菌体内。如果使用的链霉菌不含有甲基化修饰系统,那么使用DH5a(pUZ8002)菌株也是可以完成结合转移的。
pUZ8002质粒含有tra基因,能够编码转移蛋白Tra,从而实现基因DNA转移。
ET12567(pUZ8002)配套使用载体是pSET152和pKC1139.
ET12567/pUZ8002制作程序:
使用说明:
联迈生物的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
ET12567/pUZ8002的培养方法:
菌种制作菌液的方法(以一瓶为例)1、取10公斤无菌水里面的2公斤烧开,然后加入1公斤的红糖,把红糖充分融化开,便于把红糖里面的有害菌消除。
2、把3公斤的红糖水和剩下的8公斤无菌水装到一个15公斤的容器里,混合均匀,等无菌水冷却到30-40度的时候加菌种1瓶。
3、把菌种和红糖水充分的搅拌均匀,口上盖一层塑料薄膜,要密封发酵,不能漏气。不要装的太满,要预留10-15%的缓冲空间,在发酵过程中会产生气体,装满容易涨破塑料容器。
4、发酵7-12天天左右,温度低要多发酵几天,打开瓶口,有气体产生。闻到酸香味夹杂酒糟味和红糖水的刺激性气味,到就证明发酵成功。(低于15度不能发酵;15-20度发酵20-15天;20-30度,发酵15-10天;30-40度发酵10-6天,发酵时间越长效果越好);或者用PH试纸测试,PH值显示4-5之间即表明发酵成功。如果温度过低,强烈建议用取暖灯或者火炉等加热设备升温。
5、发酵成功后的菌液如果一次不能大量的使用完,就用小瓶子分装密封保存。使用一瓶打开一瓶。如果没有分装。
保存方法:1、菌液宜在常温下避光保存,底部稍有沉淀或浮有些微白沫均属正常,若气味不酸(PH应在4.5以下)或腐臭即已变质勿用。
2、每次用后盖紧瓶盖。保管得好,一年后无异味仍可使用,只是活性有所降低,需适当加大用量。
注意事项:1、制作菌液最好用深井水,若用自来水应放置24小时后用,水只需烧开1/5能够融化开红糖即可。
2、菌液不要与杀菌剂等药物同时混用,要用此类药物,相隔一天以上时间。
3、红糖用热水溶化后,水温降到30-40度,才能投入农盛乐菌种。过高或者过低均影响发酵效果。
4、制作菌液的过程中,不要频繁打开盖子,以免进入杂菌,影响发酵效果。
5、如若遇到特殊问题,请拨打销售电话详询,不要擅做主张,以免对你造成损失。
ET12567/pUZ8002注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
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文献和实验Streptomyces:Protocols/Conjugation
Intergeneric Conjugation and Overlay Description Transfer of plasmid/cosmid DNA from a host strain, e.g. E.coli ET12567 [pUZ8002], to the recipient strain, e.g. Streptomyces coelicolor. Approx. Duration
() #交换 x 轴和 y 轴> p + ylim(0,15) #如果想截取某一段可以用此命令设置值域。> p + scale_x_continuous(breaks =seq(18,34,50) ) #设置刻度线位置> p + theme(axis.text.x = element_text(angle = 90,family = "Times",face = "italic",colour = "darkred",size=rel(0.9))) # angle = 90 设置字体角度, family
Plant DNA methylation analysis by bisulfite genomic sequencing
) at temperature appropriate for used restriction enzyme; Add 0.5ml Tris-buffer-saturated phenol-chroroform, vortex; Centrifuge with Eppendorf 5414 or equivalent at 10000 x g for 2 minutes; Transfer the upper aqueous phase to clean 1.5ml
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