核酸外切酶III

核酸外切酶III

英文名：Exonuclease III
规格：2500U
产品简介:
Exonuclease III(核酸外切酶 III)具有从双链DNA的3′-OH末端降解生成5’-单核苷酸的3′→5′外切酶活性。本酶对双链DNA具有高度特异性,能降解平滑末端、3′凹陷末端及有切口的DNA,但是不能降解3′-突出末端。所以,可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解(Double digestion)后,利用Exonuclease III的3′→5′的外切酶活性,从一端降解,得到互补的单链DNA和
5′-P单核苷酸。与核酸酶相比,本酶的碱基特异性较小,如在富含GC的位置上,由于反应停止的机率较低,可用于DNA的Deletion制作。
本产品主要用途:
1.通过部分降解双链DNA片段,产生一部分单链DNA片段,作DNA聚合酶的底物(生成的DNA可用于双脱氧法序列分析)。
2.与单链特异性核酸酶(S1 Nuclease或Mung Bean Nuclease)合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性,对于双酶切DNA片段(例如Eco R I-Pst I Fragment)能制作单向(Eco R I方向)缺失的DNA。
3.DNA-蛋白质相互作用分析。
活性单位定义:
以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
纯度:
1.50 U的本酶和1μg的Closed circular(RF I)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.50 U的本酶和1μg的pBR322-Pst I分解物在37℃下反应30分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
Buffer成分:
储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0) 25 mM,KCl 50 mM,DTT 0.5 mM,Glycerol 50 % 。反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH8.0) 500 mM,MgCl2 50mM,DTT 10 mM。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,半年以上长期保存时请在-80℃冷冻保存。