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MicroRNA靶基因验证套餐

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      1年

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    • 供应商

      上海沪震生物科技有限公司

    MicroRNA靶基因验证套餐

    服务简介:

    MicroRNA是否可以对目的基因进行干扰,目前已有相应的软件和网站可以进行预测, 但是其提供的数据只是理论上的。边择的microRNA是否能够干扰目的基因,还是需要通过相关的"MicroRNA靶基因验证实验"来进行具体探讨。

    本公司特推出“MicroRNA靶基因验证套餐”,为客户寻找或验证microRNA的靶基因。大致的实验流程如下:

    1. 构建pri-miRNA表达载体(亦可采用化学合成的miRNA mimics)、靶基因3’UTR报告质粒。
    2. 将pri-miRNA表达载体(或miRNA mimics、miRNA inhibitor)与靶基因3’UTR报告质粒共转染至293、CHO、Hela等工具细胞中。
    3. 比较处理组与对照组的荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。
    4. 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。
    5. 将pri-miRNA表达载体(或miRNA mimics、miRNA inhibitor)与含突变靶位点的靶基因3’UTR报告质粒共转染至293、CHO、Hela等工具细胞中,比较处理组与对照组的荧光素酶活性,验证前面初筛的结果。

    客户须知:

    1. pri-miRNA表达质粒或病毒、miRNA miimcs、miRNA inhibitor必须从本公司订购,本公司暂不接受外来的miRNA试剂。
    2. 本实验中所用的双荧光素酶报告载体为本公司构建开发的pYr-MirTarget。本公司暂不接受外来的靶基因3’UTR报告载体。
    3. 插入的候选靶基因的3′UTR序列默认长度约为200bp,即预测靶位点序列加上两端各一小段序列。如客户需要插入更长的3′UTR序列,实验费用另外计算。

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