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- 2025年08月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Pseudorabies virus (PRV-gC) nucleic acid assay kit (PCR)
- 库存：
10
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
次
【包装规格】24/50/96测试/盒
【类别】PCR-荧光试剂盒
【运输】低温、避光、快递免费送货上门。
【用途】生化实验，合成实验等试验。
伪狂犬病毒(PRV-gC)核酸检测试剂盒(PCR法)常见问题：
一.没有扩增产物
1.循环温度：变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度，缩短退火或延伸时间
伪狂犬病毒(PRV-gC)核酸检测试剂盒(PCR法)的改进与完善：
Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段，其缺点是：
①Klenow酶不耐高温，90℃会变性失活，每次循环都要重新加，每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期，给PCR技术操作程序添了不少困难。
②引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间的碱基错配，其PCR产物特异性较差，合成的DNA片段不均一。
2）1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA片段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次，仍需加入新酶。
3）1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。伪狂犬病毒(PRV-gC)核酸检测试剂盒(PCR法)此酶具有以下特点：
①耐高温，在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。
③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率，因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别，将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。
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文献和实验EB（溴化乙锭）到底有多毒？随着每年各类化学物质进入市场，产生残留物的数量不断增加，健康和环境成为日益关注的问题。虽然许多实验中使用的化合物是有毒的，很多都是潜在的危险，但一些化学品没有适当的危险性分类，在日常实验中被广大科研工作者所忽略。什么是EB溴化乙锭？在研究数以千计的实验室残留性有毒物质，最值得一提的就是溴化乙锭（EB；3, 8-二氨基-5-乙基-6-phenylphenanthridinium甲基溴），该物质的潜在的毒性作用已被大众广泛的认知。EB属于核酸分子嵌入剂，通常
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术，其基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点，但其对实验环境的要求严格，实验成本较高，有时还有假阳性的现象出现。 1、仪器设备 超净工作台、PCR仪、电泳仪、凝胶成像分析系统、台式离心机、旋涡混悬器等。 2、实验试剂 选用美国Stratagene公司生产的支原体检测试剂盒（内有引物、阳性
-6-phenylphenanthridinium甲基溴），该物质的潜在的毒性作用已被大众广泛的认知。EB属于核酸分子嵌入剂，通常用于分子遗传学、DNA和染色质结构分析等研究中，特别是国内实验室都在使用EB进行凝胶核酸电泳实验的染色。 EB的诱变机制 众所周知，脱氧核糖核酸(DNA)是人体内一类重要的遗传物质, 许多小分子能与DNA 分子发生相互作用. 小分子物质与DNA 的作用, 影响到DNA分子的物理化学和生理性质, 从而影响DNA的转移和复制，进而影响生物遗传特性。而EB
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