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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
RAW264.7
- 库存:
100
- 供应商:
镜像绮点
- 肿瘤类型:
白血病
- 细胞类型:
-
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
单核细胞
- 相关疾病:
白血病
- 物种来源:
单核细胞
- 免疫类型:
咨询
- 细胞形态:
不规则圆形
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 器官来源:
单核细胞
- 运输方式:
冻存/复苏
- 年限:
咨询
- 生长状态:
少量悬浮
- 规格:
T25
细胞描述
此细胞株源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。
细胞特性
1) 来源:鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;单核细胞;巨噬细胞
2) 形态:不规则圆形,纺锤状,贴壁细胞,少量悬浮。
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。

一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺,0.11g / L丙tong酸钠) (推荐iCell-0001)培养基;优质胎牛血清10 %;P/S青霉素-链霉素 1%。
2) 注意事项:
(a)在细胞生长的初始阶段,细胞以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加,细胞呈现圆形并以叠加的形式生长。细胞密度达到一定的程度,会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中,镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。
(b)该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时,用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落,收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。
(c)该细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时,细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起,有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的,在传代时应收集起来,离心后细胞沉淀可以继续培养。(d)血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化,应选用高质量的胎牛血清。
3) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
4) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:
该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落,收集细胞后离心去上清,重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后第一次传代1:2进行,后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
业务范围



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文献和实验【1】任坤. miR-24 靶向抑制 SR-BI 加剧 apoE 基因敲除鼠动脉粥样硬化的发生发展[D]. 南华大学, 2018.
【2】Su X, Li Y, Jiang M, et al. Systems pharmacology uncover the mechanism of anti-non-small cell lung cancer for Hedyotis diffusa Willd[J]. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2019, 109: 969-984.
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细胞学堂丨养不好RAW 264.7,是因为忽略了这几点,RAW264.7分化有哪些问题要注意
和培养器皿的材料也有关,有时RAW264.7细胞会出现太容易吹下的情况,连分化细胞都贴壁较松,此时更适宜用巴氏管吹打; 4. 培养时,无法保证100% 不分化,通过传代可以将分化比例控制在一定范围 5. RAW264.7细胞分裂活跃,记得每天看一看,周末也要抽点时间关心一下它哦~ 小知识 RAW 264.7细胞系的起源 加利福尼亚索尔克研究所的W. C. Raschke在雄性BAB/14小鼠腹腔注射A-MuLV(Abelson鼠科白血病病毒)诱发肿瘤的腹水中建立了RAW 264细胞
我养的是RAW264.7细胞株,前面有战友都提到过这种细胞的消化传代,但是因为这种细胞最大的特点是贴壁特别强, 每次传代都很难消化下来, 刚开始使用胰酶消化,发现37度, 消化15min细胞也还是吹不起来,后来又用单纯的用细胞刮刀刮的办法,但是这样养了一段时间,发现细胞损伤非常大,贴壁性变差,生长缓慢,后来使用了现在这个方法,到现在细胞的生长状况一直很好!简述如下:1) 将培养瓶内旧的培养液弃掉, 然后用D-Hanks液洗两次,(一定要洗干净,以免影响胰酶的消化作用)2) 加入0.25%胰酶
RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
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