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- yuanmu
- YM-C1649
- 进口/国产
- 2025年07月13日
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- 文献和实验
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- 保质期：
2年
- 保存条件：
室温,24个月
- 库存：
100
- 供应商：
上海远慕生物
- 规格：
25g
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文献和实验相关专题 生物实验中的封闭剂 Q：western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么? A：脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原 的蛋白去封闭膜，避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。 Q：请问封闭液和抗体稀释液用BSA 和脱脂奶粉有什么区别呢? 有人跟我说奶粉的封闭效果更好些，但是通常只能用于WesterBlot，如果要做ELISA或者phage display
liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达，分子量是14kd，5%的浓缩胶70v，12%，或15%的分离胶110v，跑90min。湿转：100v，90min。封闭用5%的脱脂奶粉，封闭3h（因为背景深，以为封闭久会好些）。一抗1:3000，4度过夜，二抗1:5000，孵育1h，洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深，虽然可以看见目的条带，但还是有一些非特异性的条带出现，不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。
最好是按照CST的protocol来做，比如封闭用5%牛奶（而非5%BSA,尤其是对pAKT 而言，效果更好）in TBST 室温一个小时，一抗稀释在5%BSA in TBST 中（而非5%脱脂牛奶）4度过夜，这样我相信背景会降低，提高信噪比。 chuckdouble ylhuang0502 wrote: 最好是按照CST的protocol来做，比如封闭用5%牛奶（而非5%BSA,尤其是对pAKT 而言，效果更好
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