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- 2026年01月16日
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赫澎（上海）生物
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文献和实验很多时候Elisa检测多肽效价的时候会存在多肽难以包被的问题，我在实验室对这个问题进行了研究，再此发上来一点自己的研究心得。首先，多肽包被条件是很难控制的，很多多肽用传统的碳酸盐包被液就可以达到很好的包被效果，但是有些却始终包不到板子上，这时最常用的措施是使用BSA或者其他大分子蛋白进行耦连，之后用耦连后的大分子进行包被。但是这样做最大的缺点就是成本太高，一次耦连就要几百元。鉴于此我对多肽包被条件进行了一些探索。网上常见的提高多肽包被率的方法有以下三种：1、使用紫外线照射96孔板2、改变包被
学霸精选：懂步骤让让实验更轻松 之 ELISA 抗体包被及封闭篇
学霸精选：ELISA视频： 抗体包被以及封闭 包被用抗原或抗体的浓度，包被的温度和时间，包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液，也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置过夜，37℃中保温2小时被认为具有同等的包被效果。 封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙，从而排斥在ELISA其后的步骤中干扰
酶联免疫吸附（ELISA）可以：（1）免疫酶染色各种细胞内成份的定位；（2）研究抗酶抗体的合成；（3）显现微量的免疫沉淀反应；（4）定量检测体液中抗原或抗体成份。实验原理双抗体夹心法（常用于测定抗原）用特异性抗体包被于固相载体，经洗涤后加入含有抗原之待测样品，如待检样品中有相应抗原存在，即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合，经保温孵育洗涤后，即可加入酶标记特异性抗体，再经孵育洗涤后，加底物显色进行测定，底物降解的量即为欲测抗原的量。实验步骤一、材料准备1. 实验材料：血清、血浆、体液
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