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- DSMZ细胞
- 美国/德国/日本
- ACC--1523
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃冻存
- 保质期：
二年
- 英文名：
TT
- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
1x10^6 cells
细胞英文(简称）:TT
细胞来源: ATCC DSMZ JCM ECACC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:甲状腺；髓质；癌
细胞形态:贴壁；上皮细胞样
细胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测:细胞不含有:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
传代方法建议:1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO
传代细胞培养操作步骤
1、 37度水浴加热所有试剂。
2、 吸取培养培养皿内旧培养液，放置一个干净离心管内。（为稍后终止消化作准备。）
3、 用PBS清洗培养皿，弃去。
4、 向瓶内加入消化液（胰蛋白酶液）。以能覆盖培养瓶底为宜。（一般一个大皿1ml）
5、 2-5分钟后，轻轻震荡培养皿。使TT人髓状甲状腺导管肿瘤细胞从瓶壁脱离形成细胞悬液。显微镜下观察若细胞由贴壁变为悬浮就加入血清（即原培养液）终止消化。
6、 收集细胞悬液，880转/分、5分钟离心，弃去上清液。
7、 加培养液至1ml，混匀后取10ul计数细胞。
8、 根据实验要求取适量细胞留种或接种于新的培养皿或96孔板、24孔板中，再加入相应体积的培养液。（90mm大皿是9ml，中皿好像是4mm，6孔板和小皿是2ml，96孔板是100ul）。
9、 接种好的培养皿顺时针和逆时针各转三圈，使细胞排列均匀。
10、 放入暖箱中继续培养。
细胞计数步骤：
1、将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板上.
2、将细胞悬液吸出少许，用台盼兰溶液对被稀释后滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。(台盼兰用于标记死亡细胞。)
3、镜下观察，计算计数板八大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算：
细胞数/ml＝8大格细胞总数/ 8×2×10000
细胞冻存与复苏：
TT人髓状甲状腺导管肿瘤细胞冻存和复苏的原则：慢冻快融
当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。
如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶很大，大结晶会造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。
1．冻存细胞
（1）选对数增生期细胞，在冻存前1d换液。
（2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×106／m1左右密度，离心，去上清。
（3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞成再悬液。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，它是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞的损伤
（4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m1悬液。
（5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，作好标记。
（6）冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度,在30～40 min时间内,下降到液氮表面，再停30 min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。
标准程序：
当温度在-25℃以上时， 1～2℃/min
当温度达-25℃以下时， 5～10℃/min
当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中
简易程序：
将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1～2℃的速度，在40分钟内降至液氮表面，停30分钟后，直接投人液氮中。
操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。
2. 复苏细胞
（1）从罐中取出冻存管。
（2）迅速放入37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成。
（3）冻存管用70％酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10 m1培养液。
（4）TT人髓状甲状腺导管肿瘤细胞低速离心(880r／min) 5 min，去上清后再用培养液洗一次。
（5）用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分，密度应达到107／m1，在融后稀释20倍后，仍能保持5×105／m1数量。
| ECACC细胞库 | 86052701 | 3T3 L1 | 90032601 | CV-1 Clone B5 | 91091816 | SK-HEP-1 | 94122104 | DOK | 6122002 | CHP-134 |
| ECACC细胞库 | 86060301 | SC-1 | 90040512 | LA-4 | 8011101 | Vero (AC-free) | 94122105 | SVCT | 6120601 | KARPAS 231 |
| ECACC细胞库 | 86060302 | LBRM-33-1A5 | 90050801 | MDBK | 91091914 | RT4 | 95010509 | CA46 | 7030901 | H157 |
| ECACC细胞库 | 86061001 | RBL-1 | 90050803 | NCTC 2071 | 91092002 | 70Z/3 | 7032901 | CGR8 | 96020948 | ChaGo-K-1 |
| ECACC细胞库 | 86061902 | AC2 | 90060504 | C127I | 91100402 | A2058 | 95011815 | SK-N-BE(2) | 6031001 | BICR 16 |
| ECACC细胞库 | 86062401 | BL-3 | 90061904 | BCL1 Clone CW13.20-3B3 | 91110711 | M1 | 95011816 | BE(2)-M17 | 5092806 | VP303 |
| ECACC细胞库 | 86062703 | Hep 3B | 89071903 | AK-D | 94072023 | KYSE-410 | 95011817 | BE(2)-C | 90062802 | L5178Y-R |
| ECACC细胞库 | 86070201 | JH4 clone 1 | 89072101 | 26 CB1 | 91112122 | Subclone 707 BUF | 95012613 | PNT2 | 93050408 | L5178Y-S |
| ECACC细胞库 | 86072501 | RFL-6 | 89072610 | GH1 | 91112124 | RAJI TK+ | 95012614 | PNT1A | 6032203 | BICR 3 |
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文献和实验manlyboy 各位战友，由于实验需要；急需人甲状腺癌细胞株：我查到的国内的细胞库里面有的就SW579（人甲状腺鳞癌细胞株）和TT细胞（人甲状腺髓样癌细胞），有点儿贵，还没买。不知道各位战友有没有养人甲状腺癌细胞株的？其他的人甲状腺癌细胞株也行，越多越好。因为实验中还要对细胞筛选，看哪株细胞能够符合下面实验的要求。如果有，可以联系我，最好是北京地区，方便快捷，非常感谢。 无论是购买或是合作都可以，我们这里也有我们实验室主任从国外带回来的消化道的肿瘤细胞
就越幼嫩。 第一排切片：直径最小，离生长点最近。此切片中初生分生组织已分化，原表皮层经过很少的变化形成一层表皮细胞；基本分生组织的变化也较小，主要是细胞扩大，液泡发达，细胞间隙出现，近维管束处稀疏地分布着大而色深的粘液细胞。此时，厚角组织还未形成。原形成层细胞较小，在横切面上呈多边形，径向的直径比切向的直径要短，具有浓厚的细胞质。它经细胞分裂向心地形成初生木质部，可见最近中心的原生木质部导管加厚的壁已形成。还可看到离心地形成的原生韧皮部。髓射线不明显。髓的边缘近原生木质部处有大而染色
双子叶植物草质茎大多有表皮，应注意细胞 形状、外壁增厚、气孔及有无毛茸等；皮层为初生皮层，其外侧常分化为厚角组织；中柱鞘常分化为纤维或夹杂有石细胞 ；束中形成层明显；次生韧皮部大多成束状或板状；髓较大。 木质茎最外为木栓组织；皮层多为次生皮层；中柱鞘厚壁组织多连续成环或断续；形成层环明显；次生韧皮部及次生木质部呈筒状结构；射线较窄，细胞 壁常木化；髓较小。 木质藤本茎的木栓层较厚，有的有落皮层；维管组织被射线分隔成明显的放射状纹，导管孔较大，有髓周厚
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