![SK-N-SH [SKNSH]人神经母细胞瘤细胞产品图](https://custom.dxycdn.com/trademd/upload/pic/2017/06/29/B1498705701663zeymrnjt3c.png)
- ¥800 - 2350
- DSMZ细胞
- 美国/德国/日本
- ACC--1472
- 2026年10月03日
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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃冻存
- 保质期：
二年
- 英文名：
SK-N-SH [SKNSH]
- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
1x10^6 cells
细胞英文(简称）:SK-N-SH [SKNSH]
细胞来源: ATCC DSMZ JCM ECACC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:脑神经母细胞瘤，转移部位骨髓
细胞形态:贴壁；上皮细胞样
细胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测细胞不含有:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:DMEM(高糖) +10% FBS；37℃，5% CO2
传代方法建议:1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:90%FBS+10%DMSO
传代细胞培养操作步骤
1、 37度水浴加热所有试剂。
2、 吸取培养培养皿内旧培养液，放置一个干净离心管内。（为稍后终止消化作准备。）
3、 用PBS清洗培养皿，弃去。
4、 向瓶内加入消化液（胰蛋白酶液）。以能覆盖培养瓶底为宜。（一般一个大皿1ml）
5、 2-5分钟后，轻轻震荡培养皿。使SK-N-SH [SKNSH]人神经母细胞瘤细胞从瓶壁脱离形成细胞悬液。显微镜下观察若细胞由贴壁变为悬浮就加入血清（即原培养液）终止消化。
6、 收集细胞悬液，880转/分、5分钟离心，弃去上清液。
7、 加培养液至1ml，混匀后取10ul计数细胞。
8、 根据实验要求取适量细胞留种或接种于新的培养皿或96孔板、24孔板中，再加入相应体积的培养液。（90mm大皿是9ml，中皿好像是4mm，6孔板和小皿是2ml，96孔板是100ul）。
9、 接种好的培养皿顺时针和逆时针各转三圈，使细胞排列均匀。
10、 放入暖箱中继续培养。
细胞计数步骤：
1、将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板上.
2、将细胞悬液吸出少许，用台盼兰溶液对被稀释后滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。(台盼兰用于标记死亡细胞。)
3、镜下观察，计算计数板八大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算：
细胞数/ml＝8大格细胞总数/ 8×2×10000
细胞冻存与复苏：
SK-N-SH [SKNSH]人神经母细胞瘤细胞冻存和复苏的原则：慢冻快融
当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。
如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶很大，大结晶会造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。
1．冻存细胞
（1）选对数增生期细胞，在冻存前1d换液。
（2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×106／m1左右密度，离心，去上清。
（3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞成再悬液。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，它是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞的损伤
（4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m1悬液。
（5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，作好标记。
（6）冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度,在30～40 min时间内,下降到液氮表面，再停30 min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。
标准程序：
当温度在-25℃以上时， 1～2℃/min
当温度达-25℃以下时， 5～10℃/min
当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中
简易程序：
将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1～2℃的速度，在40分钟内降至液氮表面，停30分钟后，直接投人液氮中。
操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。
2. 复苏细胞
（1）从罐中取出冻存管。
（2）迅速放入37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成。
（3）冻存管用70％酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10 m1培养液。
（4）SK-N-SH [SKNSH]人神经母细胞瘤细胞低速离心(880r／min) 5 min，去上清后再用培养液洗一次。
（5）用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分，密度应达到107／m1，在融后稀释20倍后，仍能保持5×105／m1数量。
| DSMZ细胞库 | ACC 637 | LLC-PK1 | ACC 322 | N2-261 | ACC 131 | NALM-1 | ACC 668 | UPCI-SCC-131 | ACC 237 | IGR-37 |
| DSMZ细胞库 | ACC 616 | FL-64 | ACC 249 | DAN-G | ACC 214 | A4-951 | ACC 553 | JEKO-1 | ACC 436 | MOLT-13 |
| DSMZ细胞库 | ACC 653 | CHP-134 | ACC 194 | COLO-678 | ACC 693 | ELF-153 | ACC 197 | L-428 | ACC 437 | MOLT-14 |
| DSMZ细胞库 | ACC 1 | P-815 | ACC 467 | CL-11 | ACC 560 | EJM | ACC 678 | BC-2 | ACC 396 | BE-13 |
| DSMZ细胞库 | ACC 242 | GAMG | ACC 563 | HCC-78 | ACC 53 | SKW-3 | ACC 354 | MHH-PREB-1 | ACC 6 | PEER |
| DSMZ细胞库 | ACC 449 | CAL-78 | ACC 335 | V-79 | ACC 273 | B-CPAP | ACC 531 | DERL-2 | ACC 29 | MOLT-16 |
| DSMZ细胞库 | ACC 338 | DEL | ACC 258 | EFM-192A | ACC 391 | RMB-1 | ACC 460 | CAL-148 | ACC 149 | KB-V1 |
| DSMZ细胞库 | ACC 644 | DOGUM | ACC 487 | HCC-33 | ACC 405 | GMS-10 | ACC 689 | MUTZ-8 | ACC 298 | BM-1604 |
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文献和实验1. Inoculate the entire colony in 5 ml YPD culture O.N. or 12 hours 2. Dilute into YPA medium (1% yeast extract, 2% Bacto-peptone, 2%KOAC) to OD600~ 0.2, Vigorous shaking. 3. For ts mutants, ~15hours at 23C, others ~10 hours at 30C
适用标准：GB/T3536-91（克力夫兰开口杯法）GB/T267-88 产品说明： 本仪器采用当代先进技术，集机械、光学，电子及计算机技术于一体，结构紧凑。可自动完成石油产品开口闪点的测试，实验过程中的升温速率及扫描点火动作由微机控制自动进行，油气闪火时，检测系统自动捕捉并记录闪点温度。对闪点数据进行自动气压修正，并以规范的格式打印输出，还可根据需要重复打印数据。 本仪器可由计算机监控（无线/有线通讯方式，由用户选配）。 本仪器结构合理，性能稳定，操作简单，是理想的分析
刚开始养SK-BR-3时，细胞状态不是很好，贴壁也不均匀，于是开始想办法，考虑是不是吹打的不够，或是传得过多，或是其它的什么，后来发现的确如此，细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。我的传代方法是：以50平方厘米培养瓶为例，待细胞长满瓶底70％－80％1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。2 、PBS 5ml加入培养瓶，轻轻晃动培养瓶，让PBS流遍细胞表面，倒掉。3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次，倒掉。4 、加入1ml胰蛋白酶消化液，轻轻摇动培养瓶，使消化液流遍所有细胞表面，然后置37度
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