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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃冻存
- 保质期:
二年
- 英文名:
SW579 [SW 579;SW-579]
- 库存:
20
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格:
1x10^6 cells
细胞英文(简称):SW579 [SW 579;SW-579]
细胞来源: ATCC DSMZ JCM ECACC
代次:P3
规格:T25
细胞数:1x10^6 cells
组织来源:甲状腺;鳞癌
细胞形态:贴壁;上皮细胞样
细胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测细胞不含有:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:L-15 +10% FBS (不需CO2)
传代方法建议:1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO
传代细胞培养操作步骤
1、 37度水浴加热所有试剂。
2、 吸取培养培养皿内旧培养液,放置一个干净离心管内。(为稍后终止消化作准备。)
3、 用PBS清洗培养皿,弃去。
4、 向瓶内加入消化液(胰蛋白酶液)。以能覆盖培养瓶底为宜。(一般一个大皿1ml)
5、 2-5分钟后,轻轻震荡培养皿。使SW579 [SW 579;SW-579]人甲状腺鳞癌细胞从瓶壁脱离形成细胞悬液。显微镜下观察若细胞由贴壁变为悬浮就加入血清(即原培养液)终止消化。
6、 收集细胞悬液,880转/分、5分钟离心,弃去上清液。
7、 加培养液至1ml,混匀后取10ul计数细胞。
8、 根据实验要求取适量细胞留种或接种于新的培养皿或96孔板、24孔板中,再加入相应体积的培养液。(90mm大皿是9ml,中皿好像是4mm,6孔板和小皿是2ml,96孔板是100ul)。
9、 接种好的培养皿顺时针和逆时针各转三圈,使细胞排列均匀。
10、 放入暖箱中继续培养。
细胞计数步骤:
1、将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板上.
2、将细胞悬液吸出少许,用台盼兰溶液对被稀释后滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。(台盼兰用于标记死亡细胞。)
3、镜下观察,计算计数板八大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算:
细胞数/ml=8大格细胞总数/ 8×2×10000
细胞冻存与复苏:
SW579 [SW 579;SW-579]人甲状腺鳞癌细胞冻存和复苏的原则:慢冻快融
当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。
如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶很大,大结晶会造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。
1.冻存细胞
(1)选对数增生期细胞,在冻存前1d换液。
(2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×106/m1左右密度,离心,去上清。
(3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞成再悬液。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤
(4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m1悬液。
(5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,作好标记。
(6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40 min时间内,下降到液氮表面,再停30 min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。
标准程序:
当温度在-25℃以上时, 1~2℃/min
当温度达-25℃以下时, 5~10℃/min
当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中
简易程序:
将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40分钟内降至液氮表面,停30分钟后,直接投人液氮中。
操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。
2. 复苏细胞
(1)从罐中取出冻存管。
(2)迅速放入37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成。
(3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10 m1培养液。
(4)SW579 [SW 579;SW-579]人甲状腺鳞癌细胞低速离心(880r/min) 5 min,去上清后再用培养液洗一次。
(5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分,密度应达到107/m1,在融后稀释20倍后,仍能保持5×105/m1数量。
| DSMZ细胞库 | ACC 78 | DAUDI | ACC 30 | JOSK-M | ACC 598 | T2 | ACC 99 | OCI-AML2 | ACC 84 | MOLT-3 |
| DSMZ细胞库 | ACC 731 | CAKI-1 | ACC 245 | CAPAN-2 | ACC 54 | CAKI-2 | ACC 175 | HEPA 1-6 | ACC 457 | AC-1M88 |
| DSMZ细胞库 | ACC 355 | KELLY | ACC 439 | CAL-72 | ACC 540 | H-1963 | ACC 660 | UPCI-SCC-040 | ACC 162 | PA-TU-8988T |
| DSMZ细胞库 | ACC 152 | AM-C6SC8 | ACC 347 | JK-1 | ACC 163 | NCI-H929 | ACC 218 | LCL-WEI | ACC 362 | MOLT-4 |
| DSMZ细胞库 | ACC 28 | 4H1-A7 | ACC 464 | ML-1 | ACC 562 | KARPAS-231 | ACC 389 | SUP-B15 | ACC 36 | MOLT-17 |
| DSMZ细胞库 | ACC 166 | PAB-122 | ACC 413 | 639-V | ACC 244 | CAPAN-1 | ACC 363 | KYSE-70 | ACC 442 | AC-1M32 |
| DSMZ细胞库 | ACC 109 | GM-7373 | ACC 181 | IPL-LD-65Y | ACC 17 | HDLM-2 | ACC 380 | KYSE-270 | ACC 481 | ACH1P |
| DSMZ细胞库 | ACC 451 | RED-5 | ACC 555 | MOLM-16 | ACC 26 | WEHI-3B | ACC 686 | KASUMI-6 | ACC 372 | SCLC-21H |
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文献和实验manlyboy 各位战友,由于实验需要;急需人甲状腺癌细胞株:我查到的国内的细胞库里面有的就SW579(人甲状腺鳞癌细胞株)和TT细胞(人甲状腺髓样癌细胞),有点儿贵,还没买。不知道各位战友有没有养人甲状腺癌细胞株的?其他的人甲状腺癌细胞株也行,越多越好。因为实验中还要对细胞筛选,看哪株细胞能够符合下面实验的要求。如果有,可以联系我,最好是北京地区,方便快捷,非常感谢。 无论是购买或是合作都可以,我们这里也有我们实验室主任从国外带回来的消化道的肿瘤
样癌细胞 400元 CNE TCHu 13 人 鼻咽癌细胞 400元 TT TCHu 78 人 甲状腺导管癌细胞 1000元 SW579 [SW 579; SW-579] TCHu125 人 甲状腺鳞癌细胞 1000元 Eca-109 TCHu 69 人 食管癌细胞 400元 TE-1 TCHu 89 人 食管癌细胞 400元 TE-10 TCHu 90 人 食管癌细胞 400元 TE-11 TCHu 91 人 食管癌细胞 400元
藤红素和 19-048 治疗后能抑制结直肠癌细胞的增殖以及降低细胞活力。为了确定雷公藤红素和 19-048 是否通过靶向 PRDX1 影响细胞氧化还原状态,作者在 SW620 和 HCT116 细胞中用 DCFH-DA 荧光探针染色检测 ROS 水平,在不同浓度的雷公藤红素和 19-048 处理后,与对照相比,细胞中的 ROS 含量急剧升高,随后检测了雷公藤红素和 19-048 对 NCM460 细胞中 ROS 水平的影响,结果表明,雷公藤红素和 19-048 对正常细胞 ROS 诱导的影响小于癌
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