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- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 库存:
549
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1μg
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖pUC19 Vector 克隆载体优惠在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:pUC19 Vector 克隆载体优惠
编号:SY0297
产地:国产|进口
规格:1μg
pUC19 Vector,一种通用型克隆载体,大小为2686bp。主要用于DNA的克隆和测序,载体上带有lacZα片段,可用于蓝白斑筛选。本品浓度100ng/μl,保存于1×TE缓冲液(10 mM Tris-HCl, pH 8.0; 1 mM EDTA)中。
质粒图谱

pUC19 MCS

储存条件:-20℃,有效期12个月。
我公司的pUC19 Vector 克隆载体优惠,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·重组人IFN-β1b
编号:SY0613
英文名称:Recombinant Human IFN-β1b
规格:2μg
干扰素可分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素,其中IFN-β属于I型。IFN-β是由淋巴细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞等类型的细胞分泌的一类蛋白质,主要参与抗病毒感染的固有免疫应答。它有IFN-β1和IFN-β3两种亚型,因IFN-β1可减少复发率,被用于治疗多发性硬化病。
与IFN-β1a的天然状态不同,IFN-β1b存在一个氨基酸残基替换(Cys→Ser)。IFN-β1b主要应用为:
①培养骨髓细胞和淋巴细胞用于研究抗病毒应答反应;
②研究对肿瘤细胞生长的影响和对自身免疫的调制;
③研究细胞内IFNⅠ型受体活化介导的信号转导通路等。
来源:Escherichia coli.
分子量:约20.0kDa,非糖基化多肽单链,含166个氨基酸
纯度:经SDS-PAGE及HPLC检测,纯度>97%
生物学活性:抗病毒实验检测比活性不低于3.0×107 IU/mg
外观:无菌,白色冻干粉
成分:本品由溶于PBS,pH7.4的浓缩液(含有2% HBS、3%甘露醇)经0.2μm滤膜后冻干所得
内毒素含量:通过LAL方法检测,内毒素含量低于1EU/μg
注意事项
1)本品冻干之前已经0.22µm滤膜过滤,检测结果细菌、真菌和支原体均为阴性。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)本品低温取出回温至室温,开瓶前先短暂离心以保证冻干粉皆在瓶底。
2)加入无菌ddH2O或缓冲液(含0.1%BSA)溶解,使母液浓度为0.1-1.0mg/ml。母液分装成单次用量,于≤-20℃保存。
【注】:储存液2-8℃保存一周左右。长期保存需储存在-20℃或-70℃,避免反复冻融。
3)使用前,用适当的缓冲液进一步稀释到工作浓度。工作液需现配现用。
储存条件:-20℃,有效期12个月
pUC19 Vector 克隆载体优惠关键词:百奥莱博,pUC19 Vector 克隆载体,SY0297
·Hoechst 33342/PI双染试剂盒
编号:SY0500
英文名称:Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
规格:100T
Hoechst 33342/PI 双染试剂盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)双染的方法以区分凋亡细胞和坏死细胞的试剂盒。其检测原理是:细胞核荧光染料Hoechst 33342可以穿透细胞膜,嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。对于正常细胞,其可少许进入细胞膜使其染上低蓝色。而凋亡细胞由于细胞膜通透性增强,从而使得进入凋亡细胞内的Hoechst 33342明显多于正常细胞,荧光强度比正常细胞要高。另外,细胞发生凋亡时染色质会固缩,从而使得染料能更有效和聚集的结合于DNA,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受损而不能有效的将Hoechst 33342排除到细胞外使其在细胞内的积累增加,这些特征都使得凋亡细胞经染色后荧光会比正常细胞明显增强。但细胞核荧光染料PI不能穿透细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞,即活细胞对PI染料拒染。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性在早期即已丧失,可被PI染色。
经上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光+弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光+强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光+弱蓝色荧光。
本试剂盒染色快速方便,可用一步法或者两步法进行染色。使用流式细胞仪检测时,无需稀释等配制过程,也无需再准备其它任何溶液。本试剂盒足够检测100个样品,每个样品的细胞数量可达105-106个。
注意事项
1) Hoechst 33342、PI对人体有害,请注意适当防护;
2) Hoechst 33342、PI需避光,整个实验过程尽量避光操作;
3) 荧光染料均存在淬灭情况,建议染色后需尽快检测;
4) Hoechst 33342 与细胞孵育时间不宜过长,一般控制在20min以内。太长容易引起该染料的发射光谱由蓝光向红光迁移,导致红色荧光和蓝色荧光比例改变。
5) 如果用于组织样品检测,则必须把组织消化制备成单细胞悬浮液后才可以进行检测。
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期12个月
pUC19 Vector 克隆载体优惠关键词:百奥莱博,pUC19 Vector 克隆载体,SY0297
·天然腔肠荧光素
编号:SY0234
英文名称:Coelenterazine Native
规格:1×500μg
本品为粉末形式供应的天然腔肠素(Coelenterazine native),是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,也是水母发光蛋白的辅助因子,应用非常广泛,可用于检测活细胞中钙离子浓度,基因报告分析,BRET(生物发光共振能量转移)研究,ELISA,HTS,以及组织或细胞中ROS水平的化学发光检测。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点,1)能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂;虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物(见附录1,腔肠素及其衍生物的特性)。
中文别名:天然腔肠素;腔肠素游离酸
英文别名:3,2-Dihydro-2-(p-hydroxybenzyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzylimidazolo[1,2-a] pyrazin-3-one CLZN; Renilla luciferin; Coelenterazine free base
CAS:55779-48-1
分子式:C26H21N3O3
分子量:423.46 g/mol
外观:棕黄色粉末
溶解性:溶于甲醇或者乙醇,不可溶于DMSO
纯度:>95%(TLC)
结构:

注意事项
1) 腔肠素粉末或者储存液最好使用惰性气体-氮气或氩气,在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-80℃。管内即使有少量空气进入,也可能造成腔肠素氧化失活,使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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