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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
934
- 英文名：
C-CFP plasmid（with CMV promoter）
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别提示：包括C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：C端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)
英文名称：C-CFP plasmid（with CMV promoter）
产品规格：1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含CFP(Cyan FluorescentProtein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个CFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用CFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似，可尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| CFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyA signal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
本质粒(5010bp)的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
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文献和实验时效率最高 [2，3] 。在设计钙变色子时，用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团：蓝绿色荧光蛋白作为给体，而黄色荧光蛋白作为受体（见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴，分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用，而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质，分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念，钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的，前后融合的 CaM 的 N
Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
就行了。 如果荧光蛋白是在目的蛋白的C端，目的基因不能有终止密码子。 zhangyuxianggx 谢谢！但是我不明白我的目的基因在pGEM-gene这个质粒上，为什么还要给我pcDNA3-mCherry这个载体 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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