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- 2025年07月11日
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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验of mRNA) or random hexamers; the kit used here contains both kinds); nucleotides for DNA synthesis (dNTPs); MgC2 and buffers required by the enzyme, which are all present in the 5x Reaction Mix. Materials * iScript cDNA Synthesis Kit (BIORAD
,42℃放置2分钟; 6. 反应完成,趁热加入1 ul Superscipt II―RT,混匀; 7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶.二. cDNA 第二链的合成 : 1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega): 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd
NaOH， 1mmol/L EDTA。 (4) 将胶浸入7% TCA中，室温放置30分钟(直至染料由蓝色变至黄色)，取出置滤纸上，干燥数小时。 (5) 用保鲜膜包裹干燥的胶，室温压X光片(用增感屏时-70℃压片)。 二、其它cDNA合成技术 除Riboclone M-MLV(H-)cDNA合成技术外，Promega公司还提供有多个AMV合成试剂盒，不同试剂盒所提供的引物或引物一延接头(Primpr-Adaptor)不同，有oligo(dT)15 引物、随机引物、XbaⅠ引物-延
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