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pulldown探针
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广州伯信生物科技有限公司
技术应用
① 体外研究蛋白质与RNA互作;
客户提供
① 基因信息、标记类型和物种;
伯信提供
① 探针信息;
② 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论)。
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文献和实验cRNA 探针 cRNA探针是以eDNA为模板在体外转录而成的探针,可方便地通过已克隆于特定质粒载体的,DNA产生。这些质粒通常在紧邻多克隆位点的位置含有一个噬菌体启动子。应用相关的RNA聚合酶和4种核糖核苷(rNTPs)(其中至少一种带有标记物)进行体外转录反应,依赖DNA的RNA聚合酶以克隆的cDNA为模板,以含有标记物的三磷酸核糖核苷为原料,从启动子下游开始在体外转录产生RNA。通过改变外源cDNA在质粒中的插入方向或选用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的转录
做一个定量。 纯化GST融合蛋白时,有些容易降解的蛋白质会出现电泳时有类似GST分子量的降解条带出现。 山明水秀lxm 请问GST pulldown的柱子从哪里买到的,具体叫什么柱子呢,谢谢 xiaohuilang 上样量太大造成的 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。 实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。 试剂:NaCl, KCl,Na2HPO4,KH2PO4,Triton-100,IPTG(Merck
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